【摘 要】
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β-葡聚糖识别蛋白(3GRP)属于模式识别受体(PRR),很多无脊椎动物的βGRP具有结合β-1,3-葡聚糖的能力,在识别入侵病原物和激活免疫调控途径中起着重要作用.对克隆的家蚕βGRP
【机 构】
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西南大学蚕学与系统生物学研究所,重庆400716;江苏科技大学,江苏镇江212003;重庆大学农学及生命科学研究院,重庆,400044;西南大学蚕学与系统生物学研究所,重庆,400716
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β-葡聚糖识别蛋白(3GRP)属于模式识别受体(PRR),很多无脊椎动物的βGRP具有结合β-1,3-葡聚糖的能力,在识别入侵病原物和激活免疫调控途径中起着重要作用.对克隆的家蚕βGRP4(BmβGRP4,GenBank登录号为:GQ372969)及编码蛋白进行序列分析和诱导表达,探讨其参与免疫应答的作用方式.BmβGRP4的开放阅读框(ORF)长1 128 bp,编码375个氨基酸,具有一个由17个氨基酸组成的信号肽,预测成熟体蛋白分子质量为40.3 kD,等电点为6.5.Bm3GRP4含有一个糖苷水解酶活性结构域(Glyco_hydro_ 16),具有结合β-1,3-葡聚糖的能力.将BmβGRP4亚克隆到p28载体进行原核表达,获得带有His标签的重组蛋白.给家蚕5龄第3天幼虫分别以1×109个/头的剂量添食大肠杆菌、家蚕黑胸败血菌和家蚕白僵菌,对免疫诱导18 h后家蚕体内的BmβGRP4表达水平进行Western blotting分析,结果表明BmβGRP4能被上述3种微生物诱导而产生较强的表达活性.研究结果提示BmβGRP4可能在家蚕先天免疫应答反应中通过识别病原微生物表面的相关分子模式而发挥作用.
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