Annexin A2基因敲除MDCK细胞系的构建

来源 :动物医学进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lg97060329

【摘要】

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应用Crispr/Cas9基因编辑技术敲除MDCK细胞中的Annexin A2基因,并验证其是否为ε毒素在MDCK细胞表面的受体。根据Crispr/Cas9靶点设计原则设计靶点,构建PALentiCRISPR v2重组

【作者】

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黄静高洁夏苏苏金志颖康琳高姗杨浩辛文文赵宝华

【机构】

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军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所,河北师范大学

【出处】

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动物医学进展

【发表日期】

：

2019年5期

【关键词】

：

Crispr/Cas9技术基因敲除 ANNEXIN A2 MDCK细胞系 Crisper/Cas9 systemgene knockoutAnnexin A2

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目(31500108).

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应用Crispr/Cas9基因编辑技术敲除MDCK细胞中的Annexin A2基因,并验证其是否为ε毒素在MDCK细胞表面的受体。根据Crispr/Cas9靶点设计原则设计靶点,构建PALentiCRISPR v2重组质粒。借助Crispr/Cas9技术,将构建好的质粒转染至MDCK细胞中,用嘌呤霉素筛选敲除Annexin A2蛋白的MDCK细胞株,并通过测序和Western blot验证敲除效果。通过细胞毒性试验验证MDCK细胞膜表面的Annexin A2蛋白是否为ε毒素的受体蛋白。测序结果和Weste

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