人Tudor-SN UTR片段荧光素酶报告基因表达质粒的构建及活性检测

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目的:为深入研究Tudor-SN蛋白本身在翻译水平的调控机制奠定基础。方法以HeLa细胞全基因组DNA为模板,PCR扩增出目的基因,利用双酶切的方法将目的片段连接到pGL3-Control载体上。再将构建成功的pGL3-5′UTR、pGL3-3′UTR重组质粒分别与内参海肾荧光素酶质粒瞬时共转染HeLa细胞,培养48 h检测荧光素酶的活性。结果双酶切和基因测序法鉴定重组质粒构建成功,转染重组质粒后可检测到荧光素酶的活性;以pGL3-5′UTR质粒荧光素酶活性最高。结论成功构建了人Tudor-SN基因5′U
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