论文部分内容阅读
目的:通过体外实验探讨益气润燥汤联合照射对鼻咽癌细胞CNE-2增殖和凋亡的影响以及可能的增效机制分析.方法:体外培养CNE-2细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法、克隆形成法、流式细胞术观察益气润燥汤联合不同剂量的放射线(2、4、6、8、10Gy)照射对CNE-2细胞增殖、克隆形成、细胞周期以及凋亡的影响,并计算增敏比(SER).采用qRT-PCR法和western blot法检测益气润燥汤联合放射线照射对CNE-2细胞凋亡相关因子表达水平的影响,包括B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和Survivin.结果:①单纯放射线照射(2、4、6、8、10Gy)和加药(100μg/ml)联合放射线照射,CNE-2细胞增殖抑制率分别为(17.45±2.56)%、(22.37±3.75)%、(56.81±5.06)%、(75.34+3.79)%、(83.62±4.58)%和(31.80±3.11)%、(49.75+4.42)%、(76.25±3.49)%、(89.23±3.14)%、(94.36±2.68)%.SER为(1.144±0.01).②经放射线照射后,CNE-2细胞的克隆形成率(CFE)为(35.26±10.37)%,明显低于正常对照组(P<0.05).而加药联合干预后,CNE-2细胞的CFE为(18.64±6.84)%,明显低于单纯放疗组细胞(P<0.05).③经放射线照射后,G1期和G2/M期细胞比例分别为(47.48±5.76)%和(29.96±7.13)%,而加药联合后,CNE-2细胞的G1期和G2/M期细胞比例分别为(23.26±6.19)%和(48.71±7.45)%,与正常对照组和单纯组相比(P<0.05).④单纯放疗和加药联合组细胞凋亡率分别为(38.76+4.55)%和(72.46±8.78)% (P<0.05).⑤放射线照射联合用药组细胞Bcl-2mRNA和蛋白的相对表达量分别为(0.40+0.15)和(0.22±0.08),BaxmRNA和蛋白表达量分别为(0.89±0.18)和(0.74±0.13),与对照组和放疗组相比,均存在统计学差异(P<0.05).结论:“益气润燥汤”可增加放射线照射对CNE-2细胞增殖和克隆形成的抑制作用以及促凋亡影响,且与抑制抗凋亡基因Bcl-2的表达,促进促凋亡基因Bax的表达有关.