太湖流域土壤微生物基因组总DNA分离纯化及其质粒文库的初步构建

来源 :应用与环境生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zjj1993930

【摘要】

：

采用研磨／冻融和SDV蛋白酶K热处理以及CTAB处理等理化方法，直接从太湖流域土壤样品中抽提得到微生物总基因组DNA，所得粗DNA用透析袋法以及Nucleaotrap suspension DNA纯化试剂盒

【作者】

：

饶志明赵有玺李辉王正祥沈微方惠英诸葛健

【机构】

：

江南大学工业微生物中心和工业生物技术教育部重点实验室

【出处】

：

应用与环境生物学报

【发表日期】

：

2004年6期

【关键词】

：

太湖流域土壤微生物 DNA分离纯化质粒文库

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采用研磨／冻融和SDV蛋白酶K热处理以及CTAB处理等理化方法，直接从太湖流域土壤样品中抽提得到微生物总基因组DNA，所得粗DNA用透析袋法以及Nucleaotrap suspension DNA纯化试剂盒进行了纯化，纯化过的DNA能够满是常用限制性内切酶酶切、细菌16S rDNA通用引物和随机引物进行PCR扩增的要求，将所得纯品DNA经过EcoRI部分酶切之后与酶切并脱磷酸的pSK^+空载体连接，再以大肠杆菌JM109为宿主细胞初步构建了土壤微生物基因组文库，图6参7

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