【摘 要】
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目的 探讨n-3多不饱和脂肪酸DHA和EPA调节3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)及糖脂代谢的剂量反应关系和作用差异.方法:用10 ng/ml TNF-α处理分化成熟的3T3-L1脂肪细胞48h,诱导IR.使用Western blot检测胰岛素信号通路,葡萄糖氧化酶法(GOD-POD)法测定糖摄取,验证诱导IR效果.建模成功后,采用25、50、100、200、400μmol/L的DHA或EPA与TNF-α联合干预24h,同时设立对照组.干预后使用GOD-POD检测
【机 构】
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南方医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学系,广州510515
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目的 探讨n-3多不饱和脂肪酸DHA和EPA调节3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)及糖脂代谢的剂量反应关系和作用差异.方法:用10 ng/ml TNF-α处理分化成熟的3T3-L1脂肪细胞48h,诱导IR.使用Western blot检测胰岛素信号通路,葡萄糖氧化酶法(GOD-POD)法测定糖摄取,验证诱导IR效果.建模成功后,采用25、50、100、200、400μmol/L的DHA或EPA与TNF-α联合干预24h,同时设立对照组.干预后使用GOD-POD检测糖摄取量,油红O染色测定胞内甘油三酯(triglyceride,TG),PCR测定固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂肪酸合酶(FAS)、脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)、激素敏感性脂肪酶(HSL)mRNA表达,Western blot检测胰岛素信号通路蛋白表达.结果:TNF-α损伤胰岛素信号通路,降低胰岛素敏感性,IR建模成功.在糖代谢方面,25～400μmol/L的DHA和EPA均能改善TNF-α损伤的糖摄取,其中100和200μmol/L的效果最为显著,另外50、200、400μmol/L DHA改善效果优于同浓度EPA.脂代谢方面,各浓度DHA和EPA均增加胞内TG;适宜浓度DHA和EPA可增加促脂质合成相关基因表达,其中DHA效果更显著;除400μmol/L EPA外,各浓度DHA和EPA均能降低HSL表达.信号通路调节方面,适宜浓度的DHA和EPA可改善胰岛素底物1(IRS1)、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和葡萄糖转运受体4(GLUT4)表达,其中100、200μmol/L的调节效果最为显著,且DHA优于EPA.结论:TNF-α干预可诱导脂肪细胞IR.DHA和EPA在适宜浓度可改善糖脂代谢,调节胰岛素信号通路,但DHA效果优于EPA.当两者浓度为100、200μmol/L时,调节效果最佳.
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