竹节参总皂苷对妊娠期高血压胎盘滋养细胞氧化应激损伤与过度自噬的影响

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目的 探讨竹节参总皂苷对妊娠期高血压疾病胎盘滋养细胞氧化应激反应与自噬的影响及作用机制.方法 采用100μmol/L亚硝基左旋精氨酸甲酯(N-nitro-L-arginine methylester,L-NAME)处理人胎盘滋养细胞株 HTR-8/SV-neo 48 h,并给予竹节参总皂苷(20、40、80 μg/mL)干预24h,采用CCK-8法检测各组细胞活力;采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况;采用试剂盒检测各组细胞上清液中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽(glutataione,GSH)水平;采用qRT-PCR和Western blotting法检测各组细胞脂肪酸结合蛋白4(fatty acid binding protein 4,FABP4)mRNA和蛋白表达情况;采用Western blotting法检测各组细胞微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(microtubule associated protein 1 light chain 3 Ⅱ,LC3-Ⅱ)、LC3-Ⅰ、p62和自噬效应蛋白(Beclin-1)表达情况;采用免疫荧光法检测各组细胞LC3表达情况.结果 与模型组比较,竹节参总皂苷组细胞活力显著升高(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.01);上清液中SOD和GSH水平显著升高(P<0.01),MDA水平显著降低(P<0.01);FABP4mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05);LC3-Ⅱ和Beclin-1蛋白表达水平显著降低(P<0.05),p62蛋白表达水平显著升高(P<0.05);LC3荧光染色强度降低.结论 竹节参总皂苷能够改善妊娠期高血压疾病胎盘滋养细胞中的氧化应激反应,并抑制过度自噬,其机制可能与调控FABP4表达有关.
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