大肠杆菌巴豆甜菜碱还原酶基因缺失菌株的构建

来源 :华东理工大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：aaitata

【摘要】

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报道了体外构建caiA基因缺失的带有卡那霉素抗性基因的5.2kb线状DNA分子,以此转化大肠杆菌JM83和BL21(DE3)株,借助于体内DNA同源重组,定向敲除了大肠杆菌中的巴豆甜菜碱还原

【作者】

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张文刚叶江吴海珍张惠展

【机构】

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华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室

【出处】

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华东理工大学学报：自然科学版

【发表日期】

：

2004年5期

【关键词】

：

同源重组巴豆甜菜碱还原酶基因缺失抗性基因突变株 homologous recombination crotonobetaine reductase

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报道了体外构建caiA基因缺失的带有卡那霉素抗性基因的5.2kb线状DNA分子,以此转化大肠杆菌JM83和BL21(DE3)株,借助于体内DNA同源重组,定向敲除了大肠杆菌中的巴豆甜菜碱还原酶编码基因caiA.经遗传稳定性实验、聚合酶链反应(PCR)以及Southern鉴定,表明所获得的JM83转化子22号和BL21(DE3)转化子4号确为caiA基因缺失突变株;酶活分析结果表明,22号和4号转化子均丧失了巴豆甜菜碱还原酶活性.

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