【摘 要】
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目的 探讨免疫球蛋白κJ区的重组信号结合蛋白（RBP-Jκ）对CD133阳性室管膜细胞增殖与分化的影响及可能的机制。方法 分离孕12 d的美国癌症研究所（ICR）胚胎小鼠（3只）侧脑室室管膜细胞进行原代培养，并使用RBP-Jκ-siRNA干扰RBP-Jκ,以及选用2～3月龄体重为20～25 g的CD133-CreERTM::ROSA26-LacZ::RBP-Jκflox/flox小鼠（3只）,通过
【机 构】
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温州医科大学基础医学院解剖学教研室
【基金项目】
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国家自然科学基金（81671401,82171577）； 浙江省自然科学基金（LY22H090004）； 温州市科技局基础性医疗卫生科技项目（Y20190059）；
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目的 探讨免疫球蛋白κJ区的重组信号结合蛋白（RBP-Jκ）对CD133阳性室管膜细胞增殖与分化的影响及可能的机制。方法 分离孕12 d的美国癌症研究所（ICR）胚胎小鼠（3只）侧脑室室管膜细胞进行原代培养，并使用RBP-Jκ-siRNA干扰RBP-Jκ,以及选用2～3月龄体重为20～25 g的CD133-CreERTM::ROSA26-LacZ::RBP-Jκflox/flox小鼠（3只）,通过腹腔注射他莫昔芬（TAM）敲除RBP-Jκ,通过免疫荧光双标染色检测CD133阳性室管膜细胞的增殖和分化变化的情况，最后通过Real-time PCR、Western blotting检测RBP-Jκ及其上下游相关分子表达情况。结果 干扰或敲除RBP-Jκ后，无论是细胞还是动物水平CD133或β-半乳糖苷酶（β-GAL）/双肾上腺皮质激素（DCX）/β-微管蛋白Ⅲ（β-tubulinⅢ）、CD133或β-GAL/微管相关蛋白2（MAP-2）或神经元核抗原（NeuN）、CD133或β-GAL/增殖细胞核抗原（PCNA）双阳性细胞数目均明显增加。同时Real-time PCR和Western blotting结果表明，在干扰或敲除RBP-Jκ后RBP-Jκ-和Splity多毛增强子1（Hes1）mRNA及蛋白表达量均显著下降，而Notch1 mRNA及蛋白的表达量反而显著增加。结论 干扰或敲除RBP-Jκ,通过Notch1表达上调、Hes1表达下调，最终引起CD133阳性室管膜细胞的增殖与分化增加。
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