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目的：探讨环状RNA circKEAP1通过影响微小RNA-661（miR-661），进而调控白血病抑制因子（LIF）基因促进骨肉瘤细胞凋亡和迁移的作用及其机制。方法：采用RT-qPCR探究不同骨肉瘤细胞系和成骨细胞hFOB1.19对照中circKEAP1的表达量，并通过一代测序验证其成环剪切位点。通过PCR验证circKEAP1在互补DNA与基因组DNA中的表达，并探究其在放线菌素D作用下的降解速率。构建circKEAP1的小干扰RNA，敲减circKEAP1后通过CCK-8、流式细胞术和细胞迁移实验评估骨肉瘤细胞143B活力、凋亡和迁移的改变。萤光素酶报告基因实验评估circKEAP1与miR-661的结合情况。通过CCK-8、流式细胞术和细胞迁移实验评估miR-661抑制剂对circKEAP1敲减的影响。转录组测序结合生物信息学分析预测circKEAP1的下游靶基因，并通过萤光素酶报告基因实验评估miR-661与LIF的结合情况。通过CCK-8、流式细胞术和细胞迁移实验评估LIF过表达对circKEAP1敲减的影响。结果：RT-qPCR结果显示，与成骨细胞hFOB1.19相比，多种骨肉瘤细胞系高表达circKEAP1（P＜0.01）。circKEAP1存在于互补DNA中，而不存在于基因组DNA中，并且相对于其母基因KEAP1具有更好的稳定性。敲减circKEAP1显著抑制了143B细胞的生长，促进其凋亡，增加其迁移能力（P＜0.01）。萤光素酶报告基因实验结果显示circKEAP1能与miR-661结合（P＜0.01）。miR-661抑制剂可逆转敲减circKEAP1介导的细胞活力降低、凋亡增加和迁移能力减弱（P＜0.01）。转录组测序结合生物信息学分析锁定下游靶基因LIF。萤光素酶报告基因实验结果显示miR-661能结合LIF（P＜0.01）。RT-qPCR结果显示，敲减circKEAP1显著下调了LIF的mRNA水平（P＜0.01）。在143B细胞中过表达LIF可逆转敲减circKEAP1介导的细胞活力降低、凋亡增加和迁移能力减弱（P＜0.01）。结论：环状RNA circKEAP1能吸附miR-661，进而调控其下游靶基因LIF。circKEAP1-miR-661-LIF轴可能在骨肉瘤细胞的发生与进展中发挥重要作用。