【摘 要】
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目的表达和纯化弓形虫RH株GRA8的截短型片段,分析其诱导的免疫应答.方法从重组克隆pMD18-GRA8中切取GRA8的插入片段,亚克隆至原核表达质粒pET-23a(+)中,转化大肠杆菌BL21,PCR
【机 构】
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中山大学基础医学博士后流动站深圳市疾病预防控制中心科研基地,深圳市疾病预防控制中心,中山大学
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目的表达和纯化弓形虫RH株GRA8的截短型片段,分析其诱导的免疫应答.方法从重组克隆pMD18-GRA8中切取GRA8的插入片段,亚克隆至原核表达质粒pET-23a(+)中,转化大肠杆菌BL21,PCR和酶切鉴定转化菌落的插入序列;将构建的原核表达菌株经IPTG诱导,SDS-PAGE分析重组蛋白的表达;大量诱导表达GRA8,金属螯合层析予以纯化,将纯化蛋白免疫小鼠,观察其诱导的免疫应答.结果 GRA8基因的特异片段被亚克隆到原核表达质粒pET-23a(+),在大肠杆菌中未见GRA8的明显表达;表达的蛋白经
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