【摘 要】
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目的 探究微小RNA-215-5p(miR-215-5p)对肝癌细胞生物学特性的影响及可能分子机制.方法 实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测人正常肝细胞(LO2)和肝癌细胞(MHCC97-H)中miR-215-5p的表达量;噻唑蓝(MTT)实验检测敲低miR-215-5p对MHCC97-H细胞增殖的影响,流式细胞术检测凋亡率;Targetscan在线数据库预测miR-215-5p的靶基因,双荧光素酶报告基因验证miR-215-5p与叉头状基因家族蛋白(FOX)N1的靶向关系;Western印迹观察上调/
【机 构】
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郑州人民医院普外科,河南 郑州 450000
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目的 探究微小RNA-215-5p(miR-215-5p)对肝癌细胞生物学特性的影响及可能分子机制.方法 实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测人正常肝细胞(LO2)和肝癌细胞(MHCC97-H)中miR-215-5p的表达量;噻唑蓝(MTT)实验检测敲低miR-215-5p对MHCC97-H细胞增殖的影响,流式细胞术检测凋亡率;Targetscan在线数据库预测miR-215-5p的靶基因,双荧光素酶报告基因验证miR-215-5p与叉头状基因家族蛋白(FOX)N1的靶向关系;Western印迹观察上调/下调miR-215-5p对FOXN1蛋白水平的影响;观察共转染过表达miR-215-5p和FOXN1对FOXN1蛋白及MHCC97-H细胞生物学特性的影响.结果 miR-215-5p在MHCC97-H细胞系中表达量增加(P<0.05);敲低miR-215-5p抑制MHCC97-H细胞增殖、侵袭,促进凋亡(均P<0.05);FOXN1是miR-215-5p的下游靶基因;miR-215-5p负反馈调节FOXN1表达量;共转染过表达miR-215-5p和FOXN1可显著逆转miR-215-5p对FOXN1蛋白表达量的抑制作用,恢复其对MHCC97-H细胞增殖和侵袭抑制、凋亡促进作用.结论 miR-215-5p抑制FOXN1调控MHCC97-H细胞的恶性生物学特性.
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