高分辨率熔解曲线分析用于大肠肿瘤分子检测

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基于流行病学和病理学证据,目前认为绝大多数大肠癌(CRC)是从腺瘤逐步演变而来,进而形成人们普遍接受的“正常-小腺瘤-大腺瘤-癌”癌变模式,推动这进程是许多特定基因突变和(或)表观遗传学改变的逐步累积效应.这些特异性分子的改变可用作大肠肿瘤标志物.而寻求高效、准确、价廉的检测方法是肿瘤分子标志物检测的热点.高分辨率熔解曲线分析(HRM)是犹他州大学Wittwer实验室与美国Idaho公司联合研制的一种PCR后闭管操作技术:通过高密度荧光数据采集,直接用熔解曲线检测PCR扩增片段中微小序列差别,它是在常规PCR基础上增加一种双链DNA饱和染料,在PCR反应之后再花数分钟,就可完成样品的DNA变异扫描,无需序列特异性探针及PCR后继分管处理.具有低成本、高通量、简单、快速、不受突变位点与类型影响等优势.自2003年HRM被引入作为基因突变与分型检测的方法以来,HRM的应用研究如“雨后春笋”[1].
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