【摘 要】
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目的 探讨γ-分泌酶抑制剂3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S苯基甘氨酸t-丁酯(DAPT)与神经干细胞增殖、分化的关系.方法 分离和体外培养大鼠脑神经干细胞(NSC),采用γ-分泌酶抑制剂DAPT处理后,细胞计数和CCK8检测法观察NSC增殖能力的变化;特异性荧光免疫染色检测NSC诱导定向分化能力的变化;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Notch信号途径节点分子基因RBP-Jk和Hes1的表
【机 构】
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350004,福州,福建医科大学,分子医学研究中心生物化学与分子生物学系,350004,福州,福建医科大学,分子医学研究中心生物化学与分子生物学系,350004,福州,福建医科大学,分子医学研究中心生
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目的 探讨γ-分泌酶抑制剂3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S苯基甘氨酸t-丁酯(DAPT)与神经干细胞增殖、分化的关系.方法 分离和体外培养大鼠脑神经干细胞(NSC),采用γ-分泌酶抑制剂DAPT处理后,细胞计数和CCK8检测法观察NSC增殖能力的变化;特异性荧光免疫染色检测NSC诱导定向分化能力的变化;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Notch信号途径节点分子基因RBP-Jk和Hes1的表达.结果 DAPT能够明显抑制NSC的增殖能力;与对照组相比,NSC诱导分化为神经元和少突胶质细胞的比例分别由(3.7±1.0)%和(4.8±1.2)%上升为(13.8±1.2)%和(14.8±1.6)%,而分化成星形胶质细胞的比例由(82.8±3.7)%下降为(63.4 ±1.2)%;DAPT能下调NSC的RBP-Jk和Hes1 mRNA的表达.结论 γ-分泌酶抑制剂DAPT能抑制大鼠脑NSC的增殖,改变NSC定向分化的能力,这些作用可能是通过抑制γ-分泌酶而下调Notch信号所致。
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