将人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN）转染间充质干细胞（MSC)，检测MSCPTEN细胞基因产物的表达及其培养上清对人DBTRG胶质瘤细胞的作用。
方法原代培养人脐带MSC，将PTEN基因表达质粒pDsRed-PTEN转染MSC，培养48 h后荧光显微镜观察转染效果。将转染后MSCPTEN作为实验组，单纯MSC作为对照组。RT-PCR、Western blotting、ELISA分别检测2组细胞PTEN基因、蛋白及上清液中分泌性PTEN蛋白的表达；将体外培养的DBTRG细胞分为4组，分别加入MSC上清液和比例为25%、50%、100％的MSCPTEN上清液，继续培养24 h，细胞活性／细胞毒性试剂盒(CalceinAM/EthD-1染色）观察4组细胞的活性；将体外培养的DBTRG细胞分为3组，分别加入MSC上清液和比例为25%、100％的MSCPTEN上清液，实时细胞记录仪（RTCA）检测DBTRG细胞的生长曲线。
结果荧光显微镜下显示大量红色荧光位于MSCPTEN细胞胞内；RT-PCR、Western blotting检测发现，实验组细胞PTEN基因、蛋白的表达高于对照组。ELISA检测显示实验组细胞上清液中PTEN含量[(1.514±0.389) ng/mL]高于对照组[(0.508± 0.197)ng/mL]，差异有统计学意义(P<0.05)；CalceinAM/EthD-1染色显示，25%、50%、100% MSCPTEN上清液组DBTRG细胞死亡数量较MSC上清液组明显增多，且随着MSCPTEN上清液比例的增加，死亡细胞的数量增多，差异均有统计学意义(P<0.05)；RTCA检测显示，在加入不同上清液20 h左右，与MSC上清液组比较，25% MSCPTEN上清液组DBTRG细胞指数明显下降，100% MSCPTEN上清液组DBTRG细胞指数显著下降。
结论PTEN质粒转染MSC后MSCPTEN细胞能够稳定表达目的基因，其培养上清液明显促进人DBTRG胶质瘤细胞死亡、抑制肿瘤细胞生长，MSC介导的PTEN基因可能成为胶质瘤基因治疗的一种有效方法。