心血管疾病基因治疗的基础研究Ⅱ．Pro－UK和t－pA基因的体外表达

来源 :北京大学学报：医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：myloud911

【摘要】

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【作者】

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姚阿卿孙双丹李岱宗温进坤王贵春周爱儒黄培堂俞炜

【机构】

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北京医科大学心血管基础研究所分子生物学室,上海市肿瘤所

【出处】

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北京大学学报：医学版

【发表日期】

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1994年S1期

【关键词】

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Pro-UK或t-pA基因基因治疗血管平滑肌细胞 Pro-UK and t-PA geneGene therapyVascular smooth musct

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构建了带有人的全长Ｐｒｏ－ＵＫ或ｔ－ｐＡ基因ｃＤＮＡ的逆转录病毒质粒ｐＮ２－ＣＭＶ－ＵＫ或ｐＮ２－ＣＭＶ－ｔＰＡ。重组质粒转染包装细胞ＰＡ３ｌ７后获得含假病毒的培养上清。用假病毒上清感染培养的血管平滑肌细胞（ＶｓＭＣ），经Ｇ４ｌ８筛选得到抗性集落。Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析表明，Ｐｒｏ－ＵＫ或ｔ－ｐＡ基因已整合到宿主细胞染色体。在转染的ＶＳＭＣ中，Ｐｒｏ－ＵＫ和ｔ－ｐＡ的含量分别为２６５ｎｇ／１０７细胞／２４小时和５．６ｎｇ／１０７细胞／２４小时。溶圈法测定结果证明，Ｐｒｏ－ＵＫ基因导入细胞后可以表达出

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