不同pH值条件下兔肝金属硫蛋白与铜(Ⅱ)结合的研究

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目的 研究不同pH值条件下兔肝金属硫蛋白(MT)与铜(Ⅱ)结合情况.方法 向2ml(pH值为3,4,5,6,7)的兔肝锌-金属硫蛋白溶液加入9.2×10-4 mol/L硫酸铜溶液0.2 ml.在200~300 nm波长下测定相应pH值Zn-MT溶液及其加入硫酸铜后与铜(Ⅱ)结合的紫外吸收情况.采用半透膜透析的方法除去过量金属离子,并采用电感耦合等离子体质谱( ICP-MS)法测定金属硫蛋白与铜(Ⅱ)的结合量.结果在相同的实验条件下,与金属硫蛋白结合的铜(H)含量随着pH值的升高而增加.透析24 h后,与金属硫蛋白结合的铜(Ⅱ)含量随着pH值升高呈现先下降后升高的趋势;且当pH=5时,与金属硫蛋白结合的铜(Ⅱ)含量最低.结论 在pH=5时,金属硫蛋白释放质子,不利于铜与金属硫蛋白的结合,铜与金属硫蛋白的结合能力较弱.由于组成金属硫蛋白的α-、β-结构域的差异,不同pH值时锌和铜与金属硫蛋白的结合位点不同,使得其与金属的结合能力存在差异.在pH值为3,4时,锌从金属硫蛋白中脱落,铜的结合量增加.
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