【摘 要】
：
目的:克隆酪氨酸酶基因(TYR),并在毕赤酵母中表达和纯化其融合蛋白,体外测定纯化的TYR活性。方法:利用RT-PCR技术,从小鼠B16黑色素瘤细胞中克隆全长TYR,克隆至pMD18-T载体,进
【机 构】
：
河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室,郑州大学公共卫生学院卫生毒理学研究室,河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室,河南农业大学生命科学院细胞生物学教研室,郑州大学公共卫生学院卫生毒理学研究
论文部分内容阅读
目的:克隆酪氨酸酶基因(TYR),并在毕赤酵母中表达和纯化其融合蛋白,体外测定纯化的TYR活性。方法:利用RT-PCR技术,从小鼠B16黑色素瘤细胞中克隆全长TYR,克隆至pMD18-T载体,进行双链核苷酸序列测定。构建TYR毕赤酵母表达质粒pPICZaA-TYR并导入毕赤酵母Pichia pastoris GS115,表达的重组蛋白用SDS-PAGE和Western blot进行分析,采用Co2+离子亲和层析柱纯化TYR并采用TYR多巴速率氧化法体外测定纯化的TYR活性。结果:克隆了TYR基因。构建了重组表达质粒pPICZaA-TYR。SDS-PAGE和Western blot分析显示,在相对分子质量(Mr)为约53000处出现1条特异性蛋白带,且能与兔抗TYR抗体发生反应。结论:克隆TYR基因片段与基因库所登录的序列相一致,并在毕赤酵母中获得表达和纯化并在体外测定了纯化的TYR活性。
其他文献
消费水平与经济发展状况紧密相连.就目前来看,我国经济发展处于艰难启动期,就其原因来看:一方面市场的机制失灵,大多数产品普遍存在供大于求的问题;另一方面,国内的居民储蓄
为探究吕家坨井田地质构造格局,根据钻孔勘探资料,采用分形理论和趋势面分析方法,研究了井田7
函数思想就是用运动和变化的观点,集合与对应的思想,去分析和研究数学问题中的数量关系,建立函数关系或构造函数.运用函数的性质和图像去分析问题、转化问题,从而使问题获得
新颁布的全日制普通高级中学《数学教学大纲》(实验修订本)的必修课和选修课都增加了研究性课题的教学内容,这是中学数学教学的一个新的要求.在大纲中列出了一些参考课题的同
处于人生的花季时期的初中生活泼好动的性格决定了他们大部分人是喜欢体育课的但是有一部分学生在课堂上却表现出一种消极的状态，使得教师感到体育课难上。这些孩子对体育课存在着不同程度的厌学倾向，他们上课精力不集中、畏难情绪大、完成任务勉强、甚至借故请假、考核只求及格。其实学生存在着不同程度的厌学情绪也是不难理解的。首先现在的体育教学以竞技体育为主。体育活动枯燥，教学方法陈旧，教学手段单调;其次那就是认为文
摘要：目前交通管理专业教学中存在很多问题，现有教材的质量不高、专业设置缺乏实用性、教师学历与实际能力不符等问题比较典型，笔者结合自己的教学经验，针对这些问题提出了交通管理专业教学改革的一些策略，科学设置专业课程、加强专业教材建设、提高教师的实践能力，从不同角度针对交通管理专业教学改革的思路进行了梳理，希望本文的分析能够为同行业人士的研究带来一些帮助。 关键词：交通管理专业;教学改革;思路 在教
损害的公正分配是侵权法的一项亘古不变的思想.“过错程度”不仅对干侵权责任构成及责任分摊有重要意义,而且在保险法、合同法领域也有适用价值.现代各国侵权法普遍确立了“
汉字是中华民族的优秀文化瑰宝，特别讲究形体美和书写艺术。《语文新课程标准》也指出：“养成正确的写字姿势和良好的写字习惯，能正确、熟练地书写正楷字，做到规范、端正、整洁。”由此可见，学生通过长期的写字训练，能受到美的熏陶，培养他们坚强毅力和一丝不苟等良好习惯，使学生终身受益。作为语文教师，必须重视对学生写字能力的培养，扎实、有效地开展写字教学。 1 观察联想，活化字形，感知字形美 观察是认识事物
曰“国之大事,在祀与戎”,载“教笞不可废于家,刑罚不可捐于国”,故今学者每言吾国法律起源者,必日“家国合一,刑起于兵”.子产铸刑鼎而布于方策,有六篇而垂范后典,成大体而