青杄均一化cDNA文库构建及EST序列分析

来源 :生物技术通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:luorui2008
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以青杆花粉和针叶为材料,将青杆全长cDNA与Gateway供体载体pDONR222重组,构建了其非剪切型全长cDNA原始文库,利用基因组DNA饱和杂交技术对原始cDNA文库进行均一化处理,构建青杆的均一化全长cDNA文库。文库的总库容量为1.1×10^6CFU/mL,平均插入片段长度大于1.0kb,重组率大于95%。定量RT-PCR检测表明,青杆高丰度表达基因EFI.Ⅱ在均一化cDNA文库中的表达量下降了约41倍。接着对文库中随机的5144个克隆进行了测序,获得高质量的有效EST(express
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