【摘 要】
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目的 探讨七氟醚对幼龄大鼠学习记忆功能的影响及机制.方法 48只幼鼠随机分为对照组、七氟醚-1h组、七氟醚-3 h组与七氟醚-3 h+雷帕霉素(20 mg/kg,于麻醉前连续ip 3 d)组,每组12只.麻醉当天,对照组幼鼠吸入氧气混合氮气3h,七氟醚组以含3％七氟醚的混合气体麻醉1h或3h.4周后,应用Morris水迷宫检测幼鼠学习与记忆功能;使用电子透射显微镜观察神经元自噬;采用BrdU免疫荧光法观察幼鼠海马组织中神经元新生;Western blotting法检测幼鼠海马组织中NeuN、DCX、PI3
【机 构】
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邯郸市中心医院麻醉科,河北邯郸056008
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目的 探讨七氟醚对幼龄大鼠学习记忆功能的影响及机制.方法 48只幼鼠随机分为对照组、七氟醚-1h组、七氟醚-3 h组与七氟醚-3 h+雷帕霉素(20 mg/kg,于麻醉前连续ip 3 d)组,每组12只.麻醉当天,对照组幼鼠吸入氧气混合氮气3h,七氟醚组以含3％七氟醚的混合气体麻醉1h或3h.4周后,应用Morris水迷宫检测幼鼠学习与记忆功能;使用电子透射显微镜观察神经元自噬;采用BrdU免疫荧光法观察幼鼠海马组织中神经元新生;Western blotting法检测幼鼠海马组织中NeuN、DCX、PI3K、mTOR、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1蛋白表达.结果 与对照组比较,七氟醚-3 h组幼鼠逃避潜伏期显著增加(P＜0.05),穿越平台次数显著减少(P＜0.05),靶象限停留时间显著减少(P＜0.05);与七氟醚-3 h组比较,雷帕霉素显著缩短幼鼠逃避潜伏期(P＜0.05),增加测试中穿越平台次数(P＜0.05)与靶象限停留时间(P＜0.05).与对照组比较,七氟醚-3 h组幼鼠齿状回中神经元新生显著减少(P＜0.05),神经元新生相关蛋白NeuN与DCX表达显著降低(P＜0.05);海马组织中PI3K表达显著降低(P＜0.05),且mTOR蛋白表达显著增加(P＜0.05),而LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ与Beclin-1表达显著下调(P＜0.05),造成自噬小体显著减少(P＜0.05).与七氟醚-3 h组比较,雷帕霉素显著增加NeuN与DCX蛋白表达(P＜0.05),显著提高PI3K蛋白表达(P＜0.05),显著下调mTOR表达(P＜0.05),显著上调LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ与Beclin-1表达(P＜0.05),显著增加自噬小体的形成.结论 七氟醚通过下调PI3K,增加mTOR表达,抑制LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ与Beclin-1表达,减少自噬小体形成并抑制神经元新生,最终诱导幼鼠学习和记忆功能障碍.
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