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目的构建人野生型和突变型(A294G)血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme2,ACE2)基因真核表达载体。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)方法扩增人ACE2基因,与pcDNA3.1真核表达载体连接,构建pcDNA3.1-hACE2重组质粒,通过酶切和测序进行鉴定;以此野生型ACE2真核表达载体为模板,在pyrobestDNA高保真聚合酶的作用下利用体外定点突变法构建ACE2基因突变型重组质粒,用DpnI限制性内切酶处理聚合酶链反应产物,直接转化DH5a感