【摘 要】
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分别针对大肠杆菌irp2基因、沙门菌fim Y基因、产气荚膜梭菌plc基因设计特异性引物和TaqMan探针,并对反应条件进行优化,建立了同时检测3种细菌的多重实时荧光定量PCR检测方法.结果 显示,该方法对大肠杆菌、沙门菌、产气荚膜梭菌的质粒标准品的最低检出限分别为9.28×103,3.09×103,4.37×103拷贝/μL,灵敏性较强;仅特异性扩增大肠杆菌、沙门菌、产气荚膜梭菌,对其他细菌无扩增曲线,有较强特异性;组内与组间变异系数均小于5％,有较好重复性.本试验建立的检测方法为大肠杆菌、沙门菌、产气
【机 构】
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吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春130118;吉林省预防兽医学重点实验室,吉林吉林市132109;吉林农业科技学院动物科技学院,吉林吉林市132109;吉林省预防兽医学重点实验室,吉林吉林市13
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分别针对大肠杆菌irp2基因、沙门菌fim Y基因、产气荚膜梭菌plc基因设计特异性引物和TaqMan探针,并对反应条件进行优化,建立了同时检测3种细菌的多重实时荧光定量PCR检测方法.结果 显示,该方法对大肠杆菌、沙门菌、产气荚膜梭菌的质粒标准品的最低检出限分别为9.28×103,3.09×103,4.37×103拷贝/μL,灵敏性较强;仅特异性扩增大肠杆菌、沙门菌、产气荚膜梭菌,对其他细菌无扩增曲线,有较强特异性;组内与组间变异系数均小于5％,有较好重复性.本试验建立的检测方法为大肠杆菌、沙门菌、产气荚膜梭菌的临床快速检测及流行病学调查提供了一种有效手段.
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猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)是严重危害世界养猪业的重要病原.PRRSV对原代猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophage,PAM)和传代猪肺泡巨噬细胞系(im-mortalized porcine alveolar macrophage,IPAM)均易感,但在感染早期,PRRSV在IPAM中的感染率显著高于PAM.为了揭示这2种细胞在PRRSV感染后的应答差异,本研究运
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