人源肺细胞cDNA文库构建及与流感病毒NP互作宿主蛋白的筛选

来源 :中国农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yyx19870907
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【目的】构建肺组织细胞Calu-3及A549的高质量酵母cDNA文库并筛选与流感病毒NP蛋白相互作用的宿主因子,为深入研究流感病毒NP蛋白功能、病毒复制及致病机制奠定基础。【方法】提取等量Calu-3及A549细胞的总RNA,混合后反转录生成cDNA,利用长距离PCR(LD-PCR)扩增合成dscDNA,用CHROMA SPINTM+TE-400纯化柱纯化dsDNA,按照Clontech公司的Make Your Own"Mate&Plate"Library System操作程序,将带有同源臂的dscDNA
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