【摘 要】
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通过对呈味肽LGD、AD、VD结构的分析，引入甲酸和胰蛋白酶的专一性位点，设计了呈味肽的串联单体。根据大肠杆菌偏嗜密码子设计并合成寡核苷酸片段，利用拼接法合成此三种肽的8拷贝
【基金项目】
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国家863计划(2013AA100203);江苏省普通高校研究生科研创新计划(CXZZ12_0699)
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通过对呈味肽LGD、AD、VD结构的分析，引入甲酸和胰蛋白酶的专一性位点，设计了呈味肽的串联单体。根据大肠杆菌偏嗜密码子设计并合成寡核苷酸片段，利用拼接法合成此三种肽的8拷贝片段，将其克隆至表达载体pET-30a并转化到宿主菌BL21（DE3）中。筛选的阳性克隆经测序表明，本研究已成功构建了重组呈味肽工程菌BL21-pET30—8GD、BL21-pET30—8AD、BL21-pET30—8VD。IPTG＇~导的菌体总蛋白和破碎液上清的纯化物经Tricine—SDS—PAGE电泳检测，证明目的基因得以成功表
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