【摘 要】
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目的 建立呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus,RSV）滴度的间接免疫荧光检测方法，并进行验证。方法 以Synagis（Palivizumab）为一抗，荧光标记羊抗人IgG为二抗，建立用于RSV滴度检测的间接免疫荧光法，并对HEp-2细胞接种密度（3×10~4、4×10~4、5×10~4、6×10~4、7×10~4、8×10~4个/孔）、细胞培养液中胎牛血清浓度（
【基金项目】
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吉林省科技发展计划项目（20200404119YY）；
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目的 建立呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus,RSV）滴度的间接免疫荧光检测方法，并进行验证。方法 以Synagis（Palivizumab）为一抗，荧光标记羊抗人IgG为二抗，建立用于RSV滴度检测的间接免疫荧光法，并对HEp-2细胞接种密度（3×10~4、4×10~4、5×10~4、6×10~4、7×10~4、8×10~4个/孔）、细胞培养液中胎牛血清浓度（2.5%、5%、10%、20%）、病毒培养时间（20、24、26、30、38、48 h）、抗体稀释度[一抗：1∶（1 000/3）、1∶1 000、1∶3 000、1∶9 000，二抗：1∶（400/3）、1∶400、1∶1 200]进行优化。验证方法的特异性、线性范围、准确性、重复性。结果 建立的方法最佳工作条件：HEp-2细胞接种密度为6×104个/孔，胎牛血清浓度为2.5%，病毒培养时间为24～26 h，一抗稀释度为1∶1 000，二抗稀释度为1∶400。RSV可见特异性荧光，狂犬病病毒、流感病毒、风疹病毒均未见荧光；RSV滴度理论值在1.70×10~7～5.43×10~3FFU/mL范围内，与检测值呈良好的线性关系，回归方程为y=1.031 3 x-0.250 8,R2=0.989 7；准确性验证回收率在70%～130%范围内；重复性验证RSD均≤15%。结论 建立的RSV滴度间接免疫荧光检测方法具有良好的特异性、准确性、重复性，且检测周期短，可用于RSV滴度快速检测。
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互动行为研究是课堂教学领域重要的研究论题，与教学紧密相关。本研究从“人与人”“人与物”教学互动行为两大维度出发，运用MAXQDA质性量化分析软件，对线上、线下教学视频进行编码。通过对线上、线下教学视频编码分析发现，线上、线下教学人际互动以教师为主导，呈控制型特征；线上教学的人与技术互动比率高于线下，人与现代信息技术互动深度有待进一步挖掘；线上教学教师提问率低于线下，互动内容呈单一化、表面化特征。基
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文章结合疫情期间线上教学和线下教学的情况，探索出线上线下混合教学模式，以大单元教学视角和混合教学模式为依托，借助六年级上册“走进外国名著”单元的语文课程教学经验，梳理出线上线下混合教学模式的初始形态——微课+学习单。在智慧教室助力下，混合教学模式得以不断融合，实现了教与学的最优化。线上线下混合教学模式的创新是教学改革的新形式，促进了学生的深度学习。
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