重组人CD40胞外结构域在大肠杆菌中的表达和纯化鉴定

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目的构建人CD40胞外结构域(exCD40)的原核表达载体,获得可溶性产物。方法以RT-PCR方法从人白细胞总RNA中扩增编码CD40胞外区的cDNA,构建羧基端融合His6标签的exCD40的原核表达载体,在大肠杆菌中表达,并对表达产物进行复性、纯化和鉴定。结果构建了exCD40的原核表达载体,并在大肠杆菌中获得高表达,Mr为23000,与理论大小相符,表达产物主要存在于包涵体中,经Ni^2+-NTA柱上复性和纯化获得纯度达95%的可溶性exCD40蛋白,该蛋白能与细胞上的CD40L结合。结论从大肠杆菌
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