橙皮素对大鼠肾内动脉肌原性反应的影响及其机制

来源 :中国临床药理学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lijincai0122
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目的 探讨橙皮素(HSP)对离体大鼠肾内动脉(RIA)肌原性反应的影响,并分析其与蛋白激酶C(PKC)、内向整流钾通道(Kir)的相关性.方法 将雄性SD大鼠断头处死后,取其肾脏放于生理盐溶液(PSS)中,显微镜下分离并剪取2 mm的RIA血管环用于微血管张力测定实验.血管环抑制收缩实验:将同一根RIA的不同段随机分为KCl收缩组、PE收缩组、VP收缩组、BaCl2收缩组(加入30μmol·L-1 HSP预孵30 min后分别加入60 mmol·L-1 KCl,10μmol·L-1 PE,3μmol·L-1 VP,0.3 mmol·L-1 BaCl24种收缩剂直至RIA达到收缩坪台);舒张机制实验:将同一根RIA的不同段随机分为KCl预收缩组、PE预收缩组、VP预收缩组、BaCl2预收缩组(预收缩组中加入上述相同浓度的4种收缩剂收缩RIA后,加入PKA、PKC抑制剂各1μmol·L-1预孵15 min,30μmol·L-1 HSP舒张RIA).膜片钳实验:将RIA平滑肌细胞(SMCs)Kir电流密度分为BaCl2联合组、G?6983联合组;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR):将RIA分为对照组和HSP组(预孵30μmol·L-1 HSP 8h).用血管环实验记录RIA血管张力的变化,用膜片钳实验记录RIA SMCs Kir电流密度的变化,用qRT-PCR检测Kir2.1和PKC-α、PKC-β基因表达水平.结果 KCl收缩组,PE收缩组,VP收缩组,BaCl2收缩组RIA收缩百分率分别为(24.25±6.11)%,(20.09±12.67)%,(48.14±1.68)%,(15.26±6.66)%;KCl预收缩组,PE预收缩组,VP预收缩组,BaCl2预收缩组的舒张百分率分别为(21.35±5.55)%,(27.84±8.64)%,(23.30±12.01)%,(19.22±2.22)%;BaCl2联合组、G?6983联合组RIA SMCs Kir电流分别为(-4.29±0.26),(-10.65±1.10)pA/pF;Kir 2.1通道、PKC-α、PKC-β的mRNA相对表达量分别为1.91±0.23,0.52±0.29,0.69±0.14.组间比较,差异均有统计学差异(均P<0.05).结论 HSP有抑制RIA收缩的作用,且HSP该作用与舒张预收缩RIA的作用均可能与Kir通道的开放和PKC介导的通路有关.
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