【摘 要】
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以酶蛋白表达量、酶活性和比活性为指标 ,从工程菌菌株、转化方法、诱导表达时间、诱导剂浓度 4个方面 ,对TaqDNA聚合酶制备技术进行了优化筛选。用JM 1 0 9菌株制备的总酶活
【基金项目】
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亚洲玉米生物技术网项目 (AMBIONETICC5 2 4 7B2 4 )
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以酶蛋白表达量、酶活性和比活性为指标 ,从工程菌菌株、转化方法、诱导表达时间、诱导剂浓度 4个方面 ,对TaqDNA聚合酶制备技术进行了优化筛选。用JM 1 0 9菌株制备的总酶活力高于DH5α ,电击法的转化率高于热激法 ,用 1 0mmol/LIPTG诱导 1 2h ,酶蛋白表达量、酶活性和比活性均显著高于其他浓度和时间的处理。SDS PAGE电泳和PCR扩增结果表明 ,用优化技术制备的TaqDNA聚合酶 ,纯度、酶活力和特异性均达到分子生物学实验的要求 ,各项指标优于市售商品酶
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