微RNA-214靶向性别决定区Y-box 4对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖凋亡的影响

来源 :中华风湿病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hdw1978
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目的

探讨微RNA(miR)-214靶向性别决定区Y-box 4(SOX4)对RA滑膜成纤维细胞增殖、凋亡的影响。

方法

收集2017—2019年商丘市第一人民医院就诊的45例RA患者的滑膜组织样本和30例接受关节置换手术的关节创伤患者的滑膜组织样本,分别作为RA组和对照组。通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测滑膜组织中miR-214和SOX4表达水平;ELISA法检测患者血清RF、CRP浓度,采用血沉动态分析仪检测ESR浓度,Pearson相关分析miR-214及SOX4与患者血清RF、CRP、ESR相关性。采用Lipofectamine 3000将人成纤维样滑膜细胞(HFLS)-RA细胞分为对照组、miR-214 mimic组、mimic-NC组、miR-214 mimic+pcDNA3.1-SOX4组。通过CCK8检测各组细胞活力,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测相关指标蛋白表达水平。2组比较采用独立样本t检验,多组比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验。

结果

与对照组(4.6±0.7,1.9±0.7)和HFLS细胞(1.00±0.06,1.00±0.09)比,miR-214在RA患者组织(2.6±0.9)和HFLS-RA(0.30±0.05)中低表达(t=10.026,P<0.05;t=15.815,P<0.05);SOX4在RA患者组织(4.6±0.9)和HFLS-RA(3.89±0.41)中高表达(t=14.772,P<0.05;t=12.020,P<0.05)。RA组患者血清RF、ESR、CRP表达水平[(46±7)U/ml、(46.4±9.6)mm/1 h、(34.8±9.8)mg/ml]较对照组[(16±4)U/ml、(9.2±2.0)mm/1 h、(2.1±0.7)mg/ml]显著升高(t=22.906,P<0.05;t=25.338,P<0.05;t=22.314,P<0.05)。患者血清RF、CRP、ESR与miR-214呈负相关(r=-0.574,P<0.05;r=-0.448,P<0.05;r=-0.549,P<0.05),与SOX4、ESR呈正相关(r=0.492,P<0.05;r=0.369,P<0.05;r=0.325,P<0.05)。转染miR-214 mimic 24 h后细胞活力、Ki-67和p-p65/p65蛋白表达量较对照组和mimic-NC组显著下降(F24 h=16.980、F48 h=42.735、F72 h=164.448、FKi-67=290.112、Fp-p65/p65=223.548,P<0.05),细胞凋亡率和Bax蛋白表达量显著升高(F=344.360,P<0.05;F=106.376,P<0.05)。过表达SOX4可逆转miR-214的作用。

结论

miR-214靶向SOX4抑制RA滑膜成纤维细胞增殖,并促进凋亡,其机制可能与miR-214抑制NF-κB信号通路有关。

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