【摘 要】
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目的探讨去甲肾上腺素(NE)对体外培养的乳鼠心肌成纤维细胞(CFB)增殖和凋亡的影响及其机制。方法分离Sprague-Dawley(SD)大鼠乳鼠CFB，体外培养，设对照组(未给予任何干预)和NE不同浓度(0.1、1、10、50和100 μmol/L)处理组。水溶性四唑盐-1(WST-1)法测定CFB增殖情况，原位末端转移酶标记(TUNEL)法检测细胞凋亡情况，逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检
【机 构】
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目的探讨去甲肾上腺素(NE)对体外培养的乳鼠心肌成纤维细胞(CFB)增殖和凋亡的影响及其机制。
方法分离Sprague-Dawley(SD)大鼠乳鼠CFB，体外培养，设对照组(未给予任何干预)和NE不同浓度(0.1、1、10、50和100 μmol/L)处理组。水溶性四唑盐-1(WST-1)法测定CFB增殖情况，原位末端转移酶标记(TUNEL)法检测细胞凋亡情况，逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和原癌基因c-myc mRNA的表达水平。蛋白印迹(Western blot)法检测磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38(p-p38MAPK)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase3)的表达水平。
结果NE 1 μmol/L处理组和NE 10 μmol/L处理组CFB增殖数量明显高于对照组(1.05±0.05和1.09±0.02比1.00±0.03，P均<0.05)。NE 50 μmol/L处理组和NE 100 μmol/L处理组CFB凋亡率明显高于对照组[(22.69±2.18)%和(36.40±6.80)%比(4.50±1.08)%，P均<0.05]。在NE 10 μmol/L处理组中Ⅰ型胶原的mRNA表达水平最高，Ⅲ型胶原和c-myc mRNA的表达水平随着NE浓度增加而增高，均明显高于对照组(P均<0.05)。NE 1 μmol/L、10 μmol/L、50 μmol/L和100 μmol/L处理组p-p38MAPK及caspase3蛋白表达水平逐渐增高，均明显高于对照组(P均<0.05)。
结论低浓度NE可诱导CFB增殖，高浓度NE可促进CFB凋亡。p38MAPK磷酸化可能介导了NE对CFB增殖和凋亡的调控。
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