质粒pRSET-A前导肽串联多聚体的构建及其多克隆抗体制备

来源 :中国生物工程杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiu_yue9
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质粒pRSET—A是一个常用的高效原核表达载体,编码一N端含组氨酸标签(6×His)的34aa前导肽序列,以方便利用抗组氨酸标签抗体鉴定或纯化所表达的重组蛋白。实验设计一对两侧含编码疏水性氨基酸密码子的引物,经过扩增前导序列10~34aa基因序列,并重新克隆入质粒pRSET.A构建串联二聚体后,再利用质粒pRSET-A的BamHⅠ/BglⅡ同尾酶克隆位点,经一系列简单的酶切和连接,快速构建这一前导肽中不含组氨酸标签序列的串联多聚体基因,并成功表达其六聚体重组蛋白。将此重组蛋白主动免疫山羊,获得了
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