【摘 要】
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采取三元杂交猪的外周血，提取单核细胞总RNA，采用RT—PCR克隆猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）cDNA（GenBank登录号为DQ108393）。以pcDNA3．1（-）为质粒载体，构建猪GM—CSF基因真核
【机 构】
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南京农业大学动物繁育研究所,华中农业大学动物科技学院,江西农业大学动物科技学院
【基金项目】
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国家自然科学基金(30270959);南京农业大学校级青年创新基金(y200411)
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采取三元杂交猪的外周血，提取单核细胞总RNA，采用RT—PCR克隆猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）cDNA（GenBank登录号为DQ108393）。以pcDNA3．1（-）为质粒载体，构建猪GM—CSF基因真核表达质粒pGM—CSF，对克隆片段进行测序，并进行不同物种间同源性的比较。将重组质粒转染COS-7细胞，Western blotting鉴定表达蛋白的特异性。序列分析表明，GM—CSF的cDNA开放阅读框为435bp，编码144个氨基酸和大部分信号肽，与用作PCR引物设计的参考序列比
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