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由于全长丙型肝炎病毒NS5B的疏水性,其表达和纯化非常困难。为了分泌表达NS5B,作者对NS5B进行截短,缺失其疏水部分从而在大肠杆菌细胞中分泌表达HCV NS5B基因,并测定其活性。用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)的方法,设计截去NS5B疏水部分,PCR引物以HCV全长质粒pBRTM/HCV-1为模板,克隆到pGEM-Teasy载体中,双酶切后回收连接到pET-21b中表达。大肠杆菌培养上清过柱纯化,进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western免疫印迹显示NS5B蛋白