【摘 要】
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目的 构建β-arrestin2 的shRNA慢病毒载体,获得稳定低表达β-arrestin 2 的人非小细胞牌癌A549细胞 并验证敲低效果.方法查询 4 对可信的β-arrestin 2 敲低序列,将载体质粒
【基金项目】
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上海市浦东新区卫生系统重点学科建设项目（PWZx2014-10）
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目的 构建β-arrestin2 的shRNA慢病毒载体,获得稳定低表达β-arrestin 2 的人非小细胞牌癌A549细胞 并验证敲低效果.方法查询 4 对可信的β-arrestin 2 敲低序列,将载体质粒pSicoR-GFP线性化,构建目的质粒, 转化感受态细胞,对长出的克隆应用菌落PCR鉴定,再对阳性结果进行测序和比对分析.重组病毒质粒与另外三 种辅助包装原件载体质粒通过Lipofectamine 2000共转染293T细胞,培养48 h 后,收集细胞培养上清液,导入人非 小细胞牌癌细胞A549
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