论文部分内容阅读
目的联合应用LR克隆酶和链霉菌噬菌体OC31整合酶系统，建立一种获得位点特异整合型微环DNA的方法，为该载体在转基因研究中的应用提供科学资料。方法应用分子克隆技术，在目的基因表达盒及链霉菌attB位点两端接入XattR和XattL片段，随后插入OC31整合酶基因表达盒，构建可获得微环DNA的亲本质粒。该亲本质粒上的LattL和LattR序列可在LR克隆酶的催化下重组生成表达qbC31整合酶的微质粒和含有目的基因表达盒及attB位点的微环DNA。以限制性内切酶酶切、定性以及定量PCR分析其重组效率。并将未经