转染靶向RhoA基因小干扰RNA对高糖刺激下人肾小球系膜细胞RhoA/ROCK信号通路表达的影响

来源 :中华医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:h762106005
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读

目的 观察小G蛋白(RhoA)小干扰RNA(Stealth RNAm siRNA)对高糖刺激下的人肾小球系膜细胞(HMC)炎症反应及纤维化的影响,探讨RhoA/ROCK信号通路在糖尿病肾病发生发展中的作用.方法 传代培养的HMC同步化后分组,LipofectaminerTM2000脂质体转染抑制RhoA表达的Stealth RNA或无关的siRNA,用荧光倒置显微镜观察各组转染效率,利用实时定量RT-PCR、ELISA技术检测RhoA、ROCK-I、纤维连接蛋白(FN)、结缔组织生长因子(CTGF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达情况.结果 (1)RhoA-siRNA转染可抑制高糖刺激的HMC中P&oA、ROCK-I、CTGF mRNA的表达水平,各mRNA的表达较高糖组少26%-60%(均P<0.05).(2)RhoA-siRNA转染HMC后继续培养48 h,FN、CTGF和TNF-α仪的蛋白表达水平较高糖组明显少[FN:(1.99±0.04)mg/L比(4.31±0.13)ms/L,CTGF:(4.98-1-0.17)mg/L比(6.06±0.09)ms/L;TNF-α:(61.17±2.59)ns/L比(91.76±2.27)ng/L;均P<0.05],几乎使FN和CTGF下降到正常糖培养HMC的水平.结论 通过RNA干扰技术抑制RhoA的表达,可减少高糖刺激下HMC中FN、CTGF、TNF-α的积聚,降低细胞外基质的蓄积,减少肾小球的纤维化和炎症反应,为糖尿病肾病的防治提供新的干预靶点。

其他文献
目的 观察大豆异黄酮(SI)及其主要活性成分genistein对衰老大鼠卵巢及体外培养的卵巢颗粒细胞中雌激素受体α(ER-α)表达的影响,初步探讨SI作用于卵巢的分子机制.方法 自然老化法建立围绝经期大鼠动物模型,分别给予低剂量(50 mg/kg)、中剂量(158 mg/kg)、高剂量(500 mg/kg)的SI灌胃处理8周.采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化SP法分别检测卵巢组织
目的 探讨后腹腔镜下单切口技术行肾上腺肿瘤切除手术的可行性和应用价值.方法 2009年10月至2011年1月采用后腹腔镜单切口技术对7例肾上腺肿瘤的患者实施肾上腺切除术,采用腰部腋中线切口,长约2~3 cm,置入自制的单切口Port,手术过程分别使用Cambridge endo 可弯单通道腹腔镜器械、普通腹腔镜器械等,回顾性分析患者术中、术后情况.结果 6例单切口肾上腺切除手术取得成功,未增加皮肤
目的 探讨CD8+CD28-T细胞在哮喘发病机制中的作用及地塞米松对该细胞的影响.方法 30只BALB/c小鼠随机分为哮喘组、地塞米松组、正常对照组,各10只.哮喘组和地塞米松组给予卵白蛋白致敏后雾化吸入卵白蛋白溶液,地塞米松组每次雾化吸入前腹腔注射地塞米松1 mg/kg,各组分别于末次雾化激发后测定小鼠的气道反应性;对支气管肺泡灌洗液(BALF)行细胞总数、嗜酸性粒细胞(EOS)计数;取肺组织作
法国巴黎当地时间2011年5月20日11时,在欧洲经皮心血管介入治疗大会2011(EuroPCR2011)全体大会上,伴随着奏响的中华人民共和国国歌,《中华医学杂志》总编辑,国家心血管病中心、阜外心血管藕医院高润霖院士举起了本年度“Ethica Award”奖杯。此
目的 比较改良Dewar法和关节镜下双钮扣钢板固定法治疗新鲜Rockwood Ⅲ~Ⅴ型肩锁关节脱位的临床疗效.方法 1997年10月至2009年10月间卫生部北京医院骨科收治的新鲜Rockwood Ⅲ~Ⅴ型肩锁关节脱位患者中,随访到改良Dewar法28例,男20例,女8例,年龄18~68岁,平均随访6.8年;全关节镜下双钮扣钢板固定法24例,男19例,女5例,年龄19~65岁,平均随访1.5年.分
目的 探讨参附注射液对行全髋关节置换术的老年患者术中血流动力学和血浆E-选择素浓度的影响.方法 择期行全髋关节置换术老年患者24例,按随机数字表随机分为参附注射液组(S组)与生理盐水对照组(N组),每组12例.术前两组患者一般情况差异无统计学意义.S组:麻醉成功后予参附注射液0.2 ml/kg经外周静脉缓慢注射,继以0.8 ml·kg-1·h-1持续注入至手术结束;N组则以生理盐水替代.术后均予患
目前,针对哮喘治疗的随机研究对象大多选择理想状态下的患者,往往并未考虑患者吸烟、可逆性不好、肺功能差以及用药依从性、吸入装置使用技术和耐受性等诸多因素。
期刊
Klippel-Feil综合征(KFS)是以颈椎融合为主要特征的先天性畸形,临床极为少见,其麻醉处理有相应的特殊性.现报道KFS麻醉处理一例.  患者男,18岁,体重57 kg,身高163cm.因头昏6个月于2009年11月10日来武汉协和医院神经外科就诊,诊断为小脑畸胎瘤.既往史无特殊.体格检查:颈短,头后仰明显受限,Mallampati 评分Ⅱ级,甲颏间距≥4横指,其他系统检查无特殊.颈椎X线
期刊
患者女,30岁,主因问断发热、咳嗽3个月,发作性意识不清、头痛15 d入院.患者于3个月前(妊娠3个月)出现发热,当地医院查红细胞沉降率80 mm/h,胸部X线片示双肺粟粒状肺结核,查结核菌素试验(PPD)(+++),并查出"腹腔积液、盆腔积液",诊断为(1)粟粒性肺结核,(2)结核性腹膜炎,给予抗结核治疗.15 d前患者突然出现两眼发直、牙关紧闭、小便失禁、意识不清等症状,持续7~8 min缓解
期刊
患者男,62岁,体重72 kg,以"气管切开术后3年余,气管肉芽切除术后24 d,气急3 d"入院.既往慢性支气管炎、肺气肿病史10余年,因呼吸困难在外院行紧急气管切开,后多次肉芽增生,气管狭窄,拔管困难,更换气管套管.2008年3、7月曾两次行钬激光气管肉芽切除,术后均明显改善但不久均复发.本次术前诊断"低位气管狭窄,气管肉芽肿形成",拟行心肺分流术(CPB)下钬激光气管内肉芽切除、支架植入术。
期刊