【摘 要】
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目的:研究芪黄益气摄血方对免疫性血小板减少症(ITP)模型小鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞因子及转录因子维甲酸相关孤儿受体(ROR-γt)/叉头翼状螺旋转录因子3(Foxp3)表达的影响.方法:50只BALB/C小鼠随机分为5组,分别为正常对照组、模型对照组、芪黄益气摄血方30、60g/kg组、强的松9.1 mg/kg组,每组10只.采用豚鼠抗小鼠血小板血清(APS)腹腔注射方法,建立ITP小鼠模型;注射APS后的第8d,各组分别灌胃给药,连续灌胃14d.观察各组小鼠一般情况
【机 构】
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山东中医药大学附属医院,济南 250014;山东省中医药研究院,济南 250014;齐鲁工业大学(山东省科学院)山东省分析测试中心,济南250014
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目的:研究芪黄益气摄血方对免疫性血小板减少症(ITP)模型小鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞因子及转录因子维甲酸相关孤儿受体(ROR-γt)/叉头翼状螺旋转录因子3(Foxp3)表达的影响.方法:50只BALB/C小鼠随机分为5组,分别为正常对照组、模型对照组、芪黄益气摄血方30、60g/kg组、强的松9.1 mg/kg组,每组10只.采用豚鼠抗小鼠血小板血清(APS)腹腔注射方法,建立ITP小鼠模型;注射APS后的第8d,各组分别灌胃给药,连续灌胃14d.观察各组小鼠一般情况;检测外周血血小板计数(PLT)和血红蛋白(Hb)浓度变化;Elisa法检测血清白介素-6(IL-6)、IL-17A、IL-35、IU10、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;分离脾脏、胸腺组织,称质量,计算脏器指数;取胸骨做骨髓涂片,显微镜下进行骨髓巨核细胞分类;qRT-PCR法检测脾脏Foxp3、Ror-γt mRNA表达;Western Blot法检测脾脏Foxp3、ROR-γt蛋白表达.结果:与正常对照组比较,模型对照组小鼠外周血PLT计数、Hb和血清IL-10、IL-35、TGF-β1含量、骨髓产板巨核细胞数以及脾脏Foxp3 mRNA和蛋白表达均明显降低(P＜0.05或P＜0.01),而脾脏和胸腺指数、血清IL-6、IL-17A含量、以及脾脏Ror-γtmRNA和蛋白表达均显著升高(P＜0.01);与模型对照组比较,芪黄益气摄血方30、60g/kg组及强的松9.1 mg/kg组PLT计数、血清IL-10、IL-35、TGF-β1含量、骨髓产板巨核细胞数以及脾脏Foxp3 mRNA和蛋白表达均明显升高(P＜0.05或P＜0.01),血清IL-6、IL-17A含量均显著降低(P＜0.05或P＜0.01),芪黄益气摄血方60 g/kg组Hb浓度明显增加(P＜0.05),芪黄益气摄血方30、60 g/kg组脾脏Ror-γtmRNA和蛋白表达显著下调(P＜0.01);与芪黄益气摄血方30g/kg组比较,芪黄益气摄血方60g/kg组和强的松9.1 mg/kg组PLT计数均明显升高(P＜0.05),芪黄益气摄血方60g/kg组Foxp3 mRNA表达明显上调(P＜0.05).结论:芪黄益气摄血方能够明显改善ITP症状,增加PLT计数和骨髓产板巨核细胞数,其作用机制可能通过调控转录因子ROR-γt/Foxp3的表达,从而调节Th17/Treg细胞因子平衡,抑制炎症反应.
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