探讨细颗粒物(PM2.5)加剧慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)小鼠肺泡巨噬细胞(AM)吞噬功能缺陷的磷脂酰肌醇3－激酶δ(PI3Kδ)－Ras同源基因家族成员A(RhoA)细胞骨架机制。
方法40只小鼠按随机数字表法分为健康对照组、慢阻肺组、健康PM2.5组、慢阻肺PM2.5组各10只。采用香烟烟雾暴露法建立慢阻肺小鼠模型，健康PM2.5组及慢阻肺PM2.5组小鼠连续雾化吸入PM2.5(588 μg/m3) 90 d。不连续密度梯度离心法分离AM；流式细胞术检测AM吞噬异硫氰酸荧光素标记大肠杆菌(FITC－E.coli)能力，用平均荧光强度(MFI)和吞噬阳性细胞百分比(吞噬%)表示；实时荧光定量PCR和Western印迹法检测AM mRNA和蛋白的表达；小G蛋白活性检测试剂盒检测RhoA活性；激光共聚焦显微镜观察AM细胞骨架。
结果慢阻肺组和健康PM2.5组MFI和吞噬%[4 512±517、(32.19±4.57)%和7 631±585、(50.78±4.58)%]均显著低于健康对照组[9 857±1 042、(68.53±2.88)%]，且慢阻肺PM2.5组[3 121±393、(21.90±2.58)%]均显著低于慢阻肺组(均P<0.01)。慢阻肺组和健康PM2.5组PI3Kδ mRNA、蛋白表达(3.41±0.54、0.84±0.08和1.52±0.35、0.71±0.11)均显著高于健康对照组(1.00±0.00、0.57±0.07)(均P<0.05)，且慢阻肺PM2.5组(5.53±0.42、1.17±0.25)均显著高于慢阻肺组(均P<0.01)。慢阻肺组和健康PM2.5组RhoA mRNA、蛋白表达及活性(0.70±0.07、0.41±0.10、0.70±0.06和0.84±0.06、0.46±0.11、0.87±0.07)均显著低于健康对照组(1.00±0.00、0.56±0.09、1.19±0.09)(均P<0.05)，且慢阻肺PM2.5组(0.42±0.05、0.31±0.06、0.44±0.04)均低于慢阻肺组(均P<0.01)。AM细胞骨架：健康对照组伪足伸出长而密集，细胞可见明显膜皱褶；慢阻肺组和健康PM2.5组伪足伸出短且稀疏，细胞轻微变形；慢阻肺PM2.5组伪足伸出障碍，细胞形态僵硬，吞噬FITC－E.coli能力明显受损。基础状态及PM2.5干预后，PI3Kδ mRNA、蛋白表达与RhoA mRNA、蛋白表达及活性均呈负相关(均P<0.01)，PI3Kδ mRNA、蛋白表达与MFI均呈负相关(均P<0.05)，RhoA mRNA、蛋白表达及活性均与MFI均呈正相关(均P<0.05)。
结论PM2.5过度活化PI3Kδ，抑制RhoA活性致细胞骨架异常重排加剧慢阻肺小鼠AM吞噬功能缺陷。