【摘 要】
：
目的 利用Transwell体外迁移体系初步探索EPO在骨髓源间充质干细胞(MSC)迁移中的作用及其信号传递机制.方法 采用经典的全骨髓细胞贴壁法培养MSC,通过成骨、成脂肪等多向诱导
【机 构】
：
郧阳医学院附属东风医院,郧阳医学院临床医学研究所
论文部分内容阅读
目的 利用Transwell体外迁移体系初步探索EPO在骨髓源间充质干细胞(MSC)迁移中的作用及其信号传递机制.方法 采用经典的全骨髓细胞贴壁法培养MSC,通过成骨、成脂肪等多向诱导分化以及流式细胞术分析其表面标志(CD133、CD34、CD90、CD105)等鉴定MSC特征;以第3代MSC为实验材料,利用Transwell体外迁移体系,先观察不同浓度的rhEPO对MSC迁移的影响,随后在50 nmol/L Wortmannin、50μmol/L PD98059、10μmoL/L U73122、4μg/ml抗EPO-R IsG、30 μmol/LSB203580、10 mmol/L Straurosporine、6 nmol/L G0697、50 μmol/L Pseudo Z等不同的信号转导途径阻断剂的干预下观察EPO对迁移的影响.结果 培养的MSC呈现出CD90、CD105强阳性,具有成骨、成脂肪等多向分化能力;MSC体外迁移能力随着rhEPO浓度(1、10、100、1000 IU/ml)的递增而逐渐增强,并且rhEPO浓度在100 U/ml时,MSC迁移到滤膜上的细胞数接近于峰值;Wortmannin、PD98059、抗EPO-R IgG、Straurosporine、G06976、Pseudo Z对MSC迁移均有影响,其中U73122、抗EPO-R IgG、Straurosporine、Pseudo Z对MSC迁移阻断的效应最显著.结论 EPO-EPO-R所介导的MSC迁移与丝裂原活化蛋白激酶、磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C和蛋白激酶C-ζ(PKC-ζ)等信号传递途径有关,且PKC-ζ途径可能处于中心环节.
其他文献
目的 探讨应用改良Worst探针吻合泪小管断裂的效果.方法 对87例泪小管断裂患者随机分为2组.A组41例、B组46例,分别采用传统Worst探针和改良Worst探针寻找泪小管鼻侧断端.行泪
目的 通过研究大鼠胶原诱导件关节炎(CIA)滑膜组织细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达以及甲氨蝶呤(MTX)和环磷酰胺(CTX)对其的影响,从周期调控的角度探讨两者联合治疗类风湿关
目的 探讨髌骨置换后髌骨轨迹、髌骨厚度等对股四头肌力的影响,为指导人工膝关节置换术髌骨关节置换方法及术后膝关节功能的恢复提供理论依据.方法 收集退变性骨性关节炎行膝
目的 研究Hoxa5基因在先天性膈疝(congenital diaphragmatic hernia,CDH)胎肺中的表达特点以及探讨其在CDH肺发育不良发生机制中的可能作用.方法 采用实时荧光定量PCR(real t
目的 探讨和总结小儿药物难治性癫痫患者外科治疗的时机和疗效.方法 分析2加例小儿癫痫外科治疗后早期和远期的临床疗效和随访资料.结果 本组术后早期癫痫无发作228例,占95.0
目的:观察 His-tag 是否影响 RSV 重组蛋白 GIF/M2 的免疫原性.方法:PCR 扩增 G1 和 F/M2 基因片段,插入表达载体 pET-His 和 pET-DsbA-His 中,转化E.coli BL21(DE3),IPrG 诱
目的 探讨吡格列酮(Pio)调节树突状细胞(DC)黏附和迁移功能的可能机制.方法 体外培养人外周血单核细胞来源的DC和人脐静脉内皮细胞,使用不同浓度的Pio及加过氧化物酶体增殖物
农村卫生所作为最基层的医疗单位成为农民就医的主要途径,村医作为法定传染病责任报告人承担着传染病报告义务.为发现村卫生所报告传染病中存在的问题,提出切实可行的解决方
目的 建立量化测量组织肿胀度的研究方法,评价围手术期口服云南白药对正颌外科术后面部肿胀程度的影响.方法 将同期行Le Fort I型截骨术和双侧下颌升支矢状劈开截骨术的牙颌
目的 探讨D-柠檬烯对人膀胱癌EJ细胞生长和ras p21表达的影响.方法 采用还原四氮唑复合物(XTT)、实时定量PCR、蛋白质印迹法,对D-柠檬烯处理后的人膀胱癌EJ细胞增殖、ras基因