人精浆小分子抗菌肽的分离鉴定

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目的从人精浆中分离小分子抗菌肽,探讨精浆的抗菌机制。方法收集正常人精液,室温液化后10000r/min离心10min去除精子得到精浆。采用琼脂糖弥散法检测抗菌活性,采用对大肠杆菌(ATCC25922)的抗菌活性作为检测指标,通过阳离子交换柱SP-Sepharose分离,将有抗菌活性的洗脱产物冻干后用去离子水溶解,经过AKTA Superdex 75柱分离,收集小分子部分,应用反相高效液相色谱技术分离纯化多肽(RP-HPLC分离),检测各峰抗菌活性,基质辅助激光解吸质谱法检测相对分子质量,并鉴定其抗菌活性。
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