高效液相色谱法同时测定湿润烧伤膏中12种成分含量

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目的 建立同时测定湿润烧伤膏中 12 种成分含量的高效液相色谱(HPLC)法。方法 测定 5 种黄酮类成分(黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、千层纸素 A)含量,色谱柱为 Phenomenex Luna C18柱(250 mm × 4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈 - 0.1% 磷酸溶液(梯度洗脱),流速为 1.0 mL / min,检测波长为 275 nm,柱温为 35 ℃,进样量为 10 μL;测定 7 种生物碱类成分(黄柏碱、木兰花碱、黄连碱、表小檗碱、药根碱、小檗碱、巴马汀)含量,色谱柱为 Agilent Zorbax SB C18柱(250 mm × 4.6 mm,5 μm),流动相为 0.02 mol / L 磷酸二氢钾溶液(磷酸调 pH 至 4.0)- 乙腈(65:35,V / V),流速为 1.0 mL / min,检测波长为 345 nm,柱温为 30 ℃,进样量为 10 μL。结果 黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、千层纸素 A、黄柏碱、木兰花碱、黄连碱、表小檗碱、药根碱、小檗碱及巴马汀的质量浓度分别在0.099~1.988 mg / mL(r = 0.998 5)、0.025~0.500 mg / mL(r = 0.999 0)、0.020~0.406 mg / mL(r = 0.999 5)、0.005~0.099 mg / mL(r = 0.999 6)、0.005~0.103 mg / mL(r = 0.998 1)、0.037~0.736 mg / mL(r = 0.999 5)、0.070~1.392 mg / mL(r = 0.996 8)、0.153~3.054 mg / mL(r = 0.999 6)、0.079~1.583 mg / mL(r = 0.999 6)、0.050~0.998 mg / mL(r = 0.999 4)、0.511~10.219 mg / mL(r =0.999 7)、0.146~2.911 mg / mL(r = 0.997 6)范围内与峰面积线性关系良好;检测限为 0.001~0.043 μg,定量限为 0.003~0.130 μg;精密度、稳定性、重复性试验结果的 RSD 均小于 2.0%;平均加样回收率为 98.71%~99.90%,RSD 为 0.06%~1.24%(n = 6)。结论 该方法操作简便,结果准确,稳定性、重复性好,可用于同时测定湿润烧伤膏中上述 12 种成分的含量。
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