【摘 要】
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目的研究不同浓度生姜提取物6-姜酚对人皮肤成纤维细胞增殖、迁移能力的影响,并探讨相关机制。方法采用MTT活力试验检测不同浓度6-姜酚（0、25、50、75、100、150、200 mg/L）对皮肤成纤维细胞活性的影响,设空白对照组（人成纤维细胞）、阳性药物组（重组表皮生长因子20 mg/L）、不同浓度（100、50、25 mg/L）6-姜酚处理组。采用流式细胞术检测细胞增殖情况,Transwell
【基金项目】
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广东省中医药局科研项目（20201209）；
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目的研究不同浓度生姜提取物6-姜酚对人皮肤成纤维细胞增殖、迁移能力的影响,并探讨相关机制。方法采用MTT活力试验检测不同浓度6-姜酚（0、25、50、75、100、150、200 mg/L）对皮肤成纤维细胞活性的影响,设空白对照组（人成纤维细胞）、阳性药物组（重组表皮生长因子20 mg/L）、不同浓度（100、50、25 mg/L）6-姜酚处理组。采用流式细胞术检测细胞增殖情况,Transwell实验检测细胞迁移能力,实时荧光定量及蛋白免疫印迹实验检测细胞血小板源性生长因子（PDGF）、血管内皮生长因子（VEGF）、转化生长因子β1 （TGF-β1）、基质金属蛋白酶2（MMP2）、基质金属蛋白酶9（MMP9）m RNA和蛋白的表达情况。采用方差分析进行多组样本的差异性比较。结果 MTT及流式细胞实验结果显示,与空白对照组相比,在50～200 mg/L的范围内随着6-姜酚浓度的增大,皮肤成纤维细胞活性及增殖能力逐渐增加,差异有统计学意义（P<0.05）。Transwell结果显示,与空白对照组相比,100、50 mg/L 6-姜酚处理组的穿膜细胞数明显增多（P均<0.01）,而25 mg/L 6-姜酚处理组的迁移细胞数量与空白对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）。与空白对照组相比,100、50 mg/L 6-姜酚处理组的细胞羟脯氨酸分泌表达量明显升高（P均<0.01）,而25 mg/L 6-姜酚处理组的细胞羟脯氨酸分泌表达量与空白对照组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。实时定量聚合酶链反应结果显示,不同浓度6-姜酚作用于皮肤成纤维细胞24 h后,100、50 mg/L 6-姜酚处理组PDGF、VEGF、MMP2、MMP9 mRNA表达水平较空白对照组显著升高,差异均有统计学意义（P<0.05）;100 mg/L 6-姜酚处理组TGF-β1 mRNA表达水平较空白对照组显著升高,差异均有统计学意义（P<0.05）。蛋白免疫印迹结果显示,各浓度6-姜酚处理组PDGF、VEGF、MMP9蛋白表达水平均较空白对照组显著升高,差异均有统计学意义（P<0.05）;100、50 mg/L 6-姜酚处理组TGF-β1、MMP2蛋白表达水平较空白对照组显著升高,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 6-姜酚能够增强成纤维细胞的增殖和迁移能力,具有促进创面修复的潜能,机制可能与6-姜酚能够促进生长因子及金属蛋白酶的表达相关。
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