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摘要：为探明根部浇施（RF）和叶面喷施（FF）钼肥对黑果枸杞幼苗生长及荧光参数的影响，选出适合幼苗生长的施钼方式和施钼浓度，为黑果枸杞小浆果产业及荒漠化盐碱地治理提供一定的基础理论。以黑果枸杞幼苗为试验对象，采用室内模拟试验，设置钼浓度为0、5、10、20、30、40 μmol/L，用RF和FF等2种施钼方式探究黑果枸杞幼苗根长、株高、生物量、叶面积、叶片叶绿素含量、荧光特性指标变化。RF和FF适当浓度钼肥均能提高黑果枸杞幼苗根长、株高、生物量，RF的最适钼浓度范围低于FF;RF和FF适当浓度钼肥对叶片生长和叶绿素积累均有促进作用，FF的促进效果整体上强于RF;RF方式钼浓度在10～20 μmol/L时光合作用潜力更佳，FF方式钼浓度范围在20～30 μmol/L时光合作用潜力更佳，这与叶面积和叶绿素含量结果一致。施钼浓度和施钼方式与黑果枸杞幼苗生长之间具有明显的相关性。2种施钼方式下，适当浓度钼肥均能显著提高黑果枸杞幼苗的生长，浓度过高时又会抑制其生长;RF方式钼浓度在5～20 μmol/L时效果更佳，FF方式钼浓度在20～30 μmol/L时效果更佳。
关键词：黑果枸杞;叶面肥;根施肥;生物量;荧光参数
中图分类号： S567.1 90.6 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2021）16-0127-07
钼（Mo）是高等植物生长不可或缺的微量营养元素，在植物生长过程中具有重要生物学功能。研究发现，施钼可增强固氮酶、硝酸还原酶、黄嘌呤脱氢酶等多种酶的活性[1-3]，提高蛋白质合成能力和根瘤菌固氮能力[4];钼还与抗坏血酸的合成紧密相关，抗坏血酸在维持植物叶绿体的稳定性方面具有重要作用，因此施钼可提高植物光合作用能力，促进糖类及其他有机物质的积累[5]。钼在植物非生物胁迫的耐受方面也具有重要作用，如抗盐害[6-7]、抗旱[8-9]、抗寒[10]等。我国土壤钼资源匮乏，据报道，全球土壤中全钼的平均含量约为2.3 mg/kg，我国土壤中钼的平均含量约为1.7 mg/kg，明显低于全球平均水平[11]，而地处西北的新疆地区土壤缺钼更加严重[12]。
黑果枸杞（Lycium ruthenicum）是一种多年生茄科枸杞属多刺落叶木本植物[13-14]，在我国主要分布于新疆、青海、宁夏等地区[15]，尤其是新疆塔里木盆地和青海柴达木盆地[16-17]。黑果枸杞具有极高的药用价值，据藏医药典《晶珠本草》记载，黑果枸杞对心热病、心脏病、月经不调、尿道结石等病症具有很好的治疗效果[18]，现代研究也证明黑果枸杞具有抗氧化、抗衰老、预防动脉粥样硬化等多种功效[19-20]。同时，黑果枸杞也具有极高的生态学价值，野生黑果枸杞通常生于盐沙地、盐碱地和马路边[21]，具有抗寒、抗旱、耐土壤贫瘠、耐盐碱等生物学特征，是荒漠干旱区植物群落重要的优势种和建群种[22]，可作为干旱区盐碱地土壤改良、防风固沙、保持水土的优选树种[23-24]，被公认为是世界三大碱性土壤指示植物和先锋植物之一[25]。
通常对施肥的理解多集中于根部施肥，而事实上植物的茎叶等部位也能够吸收营养成分，即根外肥。根外肥中最常见的为葉面肥，叶面肥泛指以液态喷雾形式作用于植物叶面的各种肥料，具有针对性强、吸收快、污染小等特点[26]。叶面肥的种类繁多，常见的有元素类叶面肥、激素类叶面肥等。目前，有关元素类叶面肥如硅、钙、钾、锌、钼肥等在植物生长及品质影响方面已有不少报道[27-29]，关于黑果枸杞幼苗叶面钼肥的报道较少。本试验通过设置不同浓度梯度的含钼处理液，采用叶面喷施和传统根施2种方式进行模拟试验，从植物生长和荧光特性角度探究不同施钼方式和施钼浓度对黑果枸杞幼苗生长的影响，旨在阐明施钼方式和施钼浓度对黑果枸杞幼苗生长的影响，为黑果枸杞的人工栽培提供一定的理论支撑。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 供试材料 本次试验的供试黑果枸杞种子于2019年9月16日采自新疆库尔勒市哈拉玉宫乡，为多年生人工种植的黑果枸杞的种子。
1.1.2 钼处理液的配制 营养液采用改良的霍格兰营养液，其基础营养元素配比见表1。在改良的霍格兰营养液基础上，配制钼浓度分别为0、5、10、20、30、40 μmol/L的试验处理液，并依次记为CK、M5、M10、M20、M30、M40。以（NH4）6Mo7O24·4H2O（相对分子质量约为1 236）为钼源。
1.2 试验设计
1.2.1 幼苗培养 黑果枸杞幼苗培养开始于2019年10月3日，挑选适量均一饱满的种子，用0.5% NaClO3消毒0.5 h，用蒸馏水冲洗干净后，置于 45 ℃ 水浴锅中恒温催芽48 h。取长、宽、高为 35 cm×25 cm×8 cm的方形托盘10个，在每个托盘底部平整铺上一层厚2～3 cm的海绵，在海绵上均匀地撒上适量经过催芽处理的种子，置于型号为BIC-300的人工气候箱（上海博迅实业有限公司），设置温度为（25±1） ℃，湿度范围为70%～80%，光照—黑暗周期为16 h—8 h，昼、夜光照度分别为 6 000、0 lx。每天定时向育苗盘中喷洒蒸馏水，保证海绵全部湿润，待幼苗长出2张真叶时，改用喷洒改良霍格兰营养液，直至幼苗株高为2 cm左右时，作为试验幼苗。
1.2.2 试验处理 如表2所示，试验设根部浇施（root fertilization，简称RF）和叶面喷施（foliar fertilization，简称FF）共12个处理，每个处理重复3次。取上口径为58 mm、底部口径为20 mm、深度为110 mm的16孔育苗托盘32个。从试验苗中挑选大小长势一致的幼苗，均匀定植于托盘上，每盘10株，定植时以蛭石和珍珠岩（体积比为1 ∶ 1）为基质。将定植后的托盘置于型号为BIC-300的人工气候箱，设置温度为（25±1） ℃，相对湿度范围为70%～80%，昼、夜光照度分别为1 5000、0 lx，光照—黑暗周期为16 h—8 h。定植第1次以FF组叶片液滴刚好不下滴为宜，记录叶面喷施处理液的体积（V1），以基质完全湿润为标准，记录根施蒸馏水的体积（V2）;RF组以V1、V2为标准分别用对应处理液及蒸馏水等量处理，所有处理用塑封膜对种植孔塑封，以防止水分蒸发及喷施液体滴入根部。以后每3 d按第1次标准浇灌1次，培养1个月后进行各项生理指标测定。 1.3 样品的采集与测定
1.3.1 形态参数及生物量测定 于2019年12月5日用YMJ-B便携式活体叶面积测定仪（山东方科仪器有限公司）测定叶面积，测定时从每个托盘内随机选取3株，每株从中上部随机摘取3张功能叶，将测得的数据取平均值作为幼苗的叶面积。次日，分别摘取每个托盘内长势均匀的黑果枸杞幼苗，用蒸馏水冲洗干净并吸干表面水分，将根部与地上部分离开，用泸工数显卡尺（上海九量五金工具有限公司）测量出根部及地上部分长。接着将形态参数测定后的材料于105 ℃杀青30 min，70 ℃烘干至恒质量，称得各部位干质量，并利用干质量计算出根冠比，根冠比=根干质量/地上部分干质量。
1.3.2 叶绿素含量和荧光参数测定 2019年12月1日开始，连续3 d从每组处理中随机挑选3株幼苗，在每株幼苗的中上部挑选3张生长正旺的功能叶，用SPAD-502便携式叶绿素测定仪测定叶绿素含量（SPAD值）。用同样的选取方式测定幼苗的荧光参数，具体操作步骤：待测幼苗充分暗适应20 min后利用叶绿素荧光测定仪（Junior-PAM）测定出初始荧光（Fo），然后施加0.8 s、6 000 μmol/（m2·s）的饱和脉冲光，测得暗适应下的最大荧光产量（Fm）、可变荧光产量（Fv），依此获得光系统Ⅱ（PSⅡ）的光化学效率（Fv/Fm）。接着于当日使用饱和脉冲光将叶片活化约30 min，测定出光适应下PSⅡ的最大荧光产量（Fm′）和实际光化学效率（Y）。
1.4 数据处理
试验数据用Excel 2019和SPSS 19.0统计分析，用Duncans新复极差法对不同处理间数据进行多重比较，用Origin 8.5作图。
2 结果与分析
2.1 不同施钼方式和施钼浓度对黑果枸杞幼苗根长及株高的影响
由图1可知，随着施钼浓度升高，2种施钼方式下黑果枸杞幼苗根长和株高变化趋势一致，均先升高后降低。RF组各钼浓度处理下，根长和株高均差异显著（P
关键词：黑果枸杞;叶面肥;根施肥;生物量;荧光参数
中图分类号： S567.1 90.6 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2021）16-0127-07
钼（Mo）是高等植物生长不可或缺的微量营养元素，在植物生长过程中具有重要生物学功能。研究发现，施钼可增强固氮酶、硝酸还原酶、黄嘌呤脱氢酶等多种酶的活性[1-3]，提高蛋白质合成能力和根瘤菌固氮能力[4];钼还与抗坏血酸的合成紧密相关，抗坏血酸在维持植物叶绿体的稳定性方面具有重要作用，因此施钼可提高植物光合作用能力，促进糖类及其他有机物质的积累[5]。钼在植物非生物胁迫的耐受方面也具有重要作用，如抗盐害[6-7]、抗旱[8-9]、抗寒[10]等。我国土壤钼资源匮乏，据报道，全球土壤中全钼的平均含量约为2.3 mg/kg，我国土壤中钼的平均含量约为1.7 mg/kg，明显低于全球平均水平[11]，而地处西北的新疆地区土壤缺钼更加严重[12]。
黑果枸杞（Lycium ruthenicum）是一种多年生茄科枸杞属多刺落叶木本植物[13-14]，在我国主要分布于新疆、青海、宁夏等地区[15]，尤其是新疆塔里木盆地和青海柴达木盆地[16-17]。黑果枸杞具有极高的药用价值，据藏医药典《晶珠本草》记载，黑果枸杞对心热病、心脏病、月经不调、尿道结石等病症具有很好的治疗效果[18]，现代研究也证明黑果枸杞具有抗氧化、抗衰老、预防动脉粥样硬化等多种功效[19-20]。同时，黑果枸杞也具有极高的生态学价值，野生黑果枸杞通常生于盐沙地、盐碱地和马路边[21]，具有抗寒、抗旱、耐土壤贫瘠、耐盐碱等生物学特征，是荒漠干旱区植物群落重要的优势种和建群种[22]，可作为干旱区盐碱地土壤改良、防风固沙、保持水土的优选树种[23-24]，被公认为是世界三大碱性土壤指示植物和先锋植物之一[25]。
通常对施肥的理解多集中于根部施肥，而事实上植物的茎叶等部位也能够吸收营养成分，即根外肥。根外肥中最常见的为葉面肥，叶面肥泛指以液态喷雾形式作用于植物叶面的各种肥料，具有针对性强、吸收快、污染小等特点[26]。叶面肥的种类繁多，常见的有元素类叶面肥、激素类叶面肥等。目前，有关元素类叶面肥如硅、钙、钾、锌、钼肥等在植物生长及品质影响方面已有不少报道[27-29]，关于黑果枸杞幼苗叶面钼肥的报道较少。本试验通过设置不同浓度梯度的含钼处理液，采用叶面喷施和传统根施2种方式进行模拟试验，从植物生长和荧光特性角度探究不同施钼方式和施钼浓度对黑果枸杞幼苗生长的影响，旨在阐明施钼方式和施钼浓度对黑果枸杞幼苗生长的影响，为黑果枸杞的人工栽培提供一定的理论支撑。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 供试材料 本次试验的供试黑果枸杞种子于2019年9月16日采自新疆库尔勒市哈拉玉宫乡，为多年生人工种植的黑果枸杞的种子。
1.1.2 钼处理液的配制 营养液采用改良的霍格兰营养液，其基础营养元素配比见表1。在改良的霍格兰营养液基础上，配制钼浓度分别为0、5、10、20、30、40 μmol/L的试验处理液，并依次记为CK、M5、M10、M20、M30、M40。以（NH4）6Mo7O24·4H2O（相对分子质量约为1 236）为钼源。
1.2 试验设计
1.2.1 幼苗培养 黑果枸杞幼苗培养开始于2019年10月3日，挑选适量均一饱满的种子，用0.5% NaClO3消毒0.5 h，用蒸馏水冲洗干净后，置于 45 ℃ 水浴锅中恒温催芽48 h。取长、宽、高为 35 cm×25 cm×8 cm的方形托盘10个，在每个托盘底部平整铺上一层厚2～3 cm的海绵，在海绵上均匀地撒上适量经过催芽处理的种子，置于型号为BIC-300的人工气候箱（上海博迅实业有限公司），设置温度为（25±1） ℃，湿度范围为70%～80%，光照—黑暗周期为16 h—8 h，昼、夜光照度分别为 6 000、0 lx。每天定时向育苗盘中喷洒蒸馏水，保证海绵全部湿润，待幼苗长出2张真叶时，改用喷洒改良霍格兰营养液，直至幼苗株高为2 cm左右时，作为试验幼苗。
1.2.2 试验处理 如表2所示，试验设根部浇施（root fertilization，简称RF）和叶面喷施（foliar fertilization，简称FF）共12个处理，每个处理重复3次。取上口径为58 mm、底部口径为20 mm、深度为110 mm的16孔育苗托盘32个。从试验苗中挑选大小长势一致的幼苗，均匀定植于托盘上，每盘10株，定植时以蛭石和珍珠岩（体积比为1 ∶ 1）为基质。将定植后的托盘置于型号为BIC-300的人工气候箱，设置温度为（25±1） ℃，相对湿度范围为70%～80%，昼、夜光照度分别为1 5000、0 lx，光照—黑暗周期为16 h—8 h。定植第1次以FF组叶片液滴刚好不下滴为宜，记录叶面喷施处理液的体积（V1），以基质完全湿润为标准，记录根施蒸馏水的体积（V2）;RF组以V1、V2为标准分别用对应处理液及蒸馏水等量处理，所有处理用塑封膜对种植孔塑封，以防止水分蒸发及喷施液体滴入根部。以后每3 d按第1次标准浇灌1次，培养1个月后进行各项生理指标测定。 1.3 样品的采集与测定
1.3.1 形态参数及生物量测定 于2019年12月5日用YMJ-B便携式活体叶面积测定仪（山东方科仪器有限公司）测定叶面积，测定时从每个托盘内随机选取3株，每株从中上部随机摘取3张功能叶，将测得的数据取平均值作为幼苗的叶面积。次日，分别摘取每个托盘内长势均匀的黑果枸杞幼苗，用蒸馏水冲洗干净并吸干表面水分，将根部与地上部分离开，用泸工数显卡尺（上海九量五金工具有限公司）测量出根部及地上部分长。接着将形态参数测定后的材料于105 ℃杀青30 min，70 ℃烘干至恒质量，称得各部位干质量，并利用干质量计算出根冠比，根冠比=根干质量/地上部分干质量。
1.3.2 叶绿素含量和荧光参数测定 2019年12月1日开始，连续3 d从每组处理中随机挑选3株幼苗，在每株幼苗的中上部挑选3张生长正旺的功能叶，用SPAD-502便携式叶绿素测定仪测定叶绿素含量（SPAD值）。用同样的选取方式测定幼苗的荧光参数，具体操作步骤：待测幼苗充分暗适应20 min后利用叶绿素荧光测定仪（Junior-PAM）测定出初始荧光（Fo），然后施加0.8 s、6 000 μmol/（m2·s）的饱和脉冲光，测得暗适应下的最大荧光产量（Fm）、可变荧光产量（Fv），依此获得光系统Ⅱ（PSⅡ）的光化学效率（Fv/Fm）。接着于当日使用饱和脉冲光将叶片活化约30 min，测定出光适应下PSⅡ的最大荧光产量（Fm′）和实际光化学效率（Y）。
1.4 数据处理
试验数据用Excel 2019和SPSS 19.0统计分析，用Duncans新复极差法对不同处理间数据进行多重比较，用Origin 8.5作图。
2 结果与分析
2.1 不同施钼方式和施钼浓度对黑果枸杞幼苗根长及株高的影响
由图1可知，随着施钼浓度升高，2种施钼方式下黑果枸杞幼苗根长和株高变化趋势一致，均先升高后降低。RF组各钼浓度处理下，根长和株高均差异显著（P