【摘 要】
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为研究HMOX1在晶状体上皮细胞(HLECs)中的抗氧化功能,使用CRISPR-CAS9方法构建了HMOX1敲除细胞系,并使用重组逆转录病毒方法建立了HMOX1稳定过表达细胞系。蛋白质免疫印迹结果显示细胞系均构建成功。使用CCK8检测法观察到HMOX1过表达细胞系的细胞存活率显著提高,而敲除细胞系则相反。进一步使用流式细胞术进行ROS水平检测,发现HMOX1过表达细胞系胞内ROS水平显著低于对照细胞系,而敲除HMOX1细胞系的ROS水平则明显升高。这证明了HMOX1在HLECs中具备抗氧化功能。
【机 构】
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湖北理工学院肾脏疾病发生与干预湖北省重点实验室
【基金项目】
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湖北省自然科学基金项目(项目编号:2019CFB184),湖北理工学院引进人才项目(项目编号:18xjz20R)。
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为研究HMOX1在晶状体上皮细胞(HLECs)中的抗氧化功能,使用CRISPR-CAS9方法构建了HMOX1敲除细胞系,并使用重组逆转录病毒方法建立了HMOX1稳定过表达细胞系。蛋白质免疫印迹结果显示细胞系均构建成功。使用CCK8检测法观察到HMOX1过表达细胞系的细胞存活率显著提高,而敲除细胞系则相反。进一步使用流式细胞术进行ROS水平检测,发现HMOX1过表达细胞系胞内ROS水平显著低于对照细胞系,而敲除HMOX1细胞系的ROS水平则明显升高。这证明了HMOX1在HLECs中具备抗氧化功能。
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