针刺“百会”透“曲鬓”通过miR-34a-5p/KLF4信号通路治疗脑出血大鼠的机制研究

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目的:探讨针刺“百会”透“曲鬓”通过miR-34a-5p/KLF4信号通路治疗脑出血大鼠的机制。方法:采用自体血注入尾壳核制取脑出血大鼠模型,将造模成功的60只大鼠随机平均分为假手术组(Sham组)、模型组(ICH组)、模型+针刺治疗组(ICH+acupuncture组)、模型+针刺治疗+agomir阴性对照组(ICH+acupuncture+agomir-NC组)与模型+针刺治疗+miR-34a-5p agomir组(ICH+acupuncture+miR-34a-5p agomir组),每组随机分1 d和7 d两个时间点。使用Longa评分评定大鼠神经功能缺损情况,应用Real-time PCR检测各组miR-34a-5p和KLF4表达,应用蛋白质印迹分析各组KLF4表达水平。结果:1 d和7 d,与ICH组比较, ICH+acupuncture组脑出血大鼠血肿周围miR-34a-5p表达降低,差异具有统计学意义(P<0.01),KLF4 mRNA表达、KLF4蛋白水平升高,差异具有统计学意义(P<0.01);与ICH+acupuncture组比,ICH+acupuncture+miR-34a-5p agomir组miR-34a-5p表达升高,差异具有统计学意义(P<0.01),KLF4 mRNA表达、KLF4蛋白水平降低,差异具有统计学意义(P<0.01);7 d时,与ICH组比较, ICH+acupuncture组脑出血大鼠Longa评分降低,差异具有统计学意义(P<0.01);与ICH+acupuncture组比,ICH+acupuncture+miR-34a-5p agomir组Longa评分升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:针刺“百会”透“曲鬓”可降低脑出血大鼠Longa评分分数,改善大鼠神经功能缺损的机制为通过miR-34a-5p/KLF4信号通路抑制miR-34a-5p表达、促进KLF4 mRNA表达和提高KLF4蛋白表达水平,减轻脑出血损害实现。
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