【摘 要】
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建立了商业化种植的NeWLeaf-YTM转基因马铃薯的筛选检测和鉴定的PCR方法.该方法根据马铃薯自身patatin基因作为内源特异参照基因扩增216 bp片段,检查模板DNA提取的质量,避免
【机 构】
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辽宁出入境检验检疫局,沈阳农业大学
【基金项目】
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国家质量监督检验检疫总局科研项目;
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建立了商业化种植的NeWLeaf-YTM转基因马铃薯的筛选检测和鉴定的PCR方法.该方法根据马铃薯自身patatin基因作为内源特异参照基因扩增216 bp片段,检查模板DNA提取的质量,避免了假阴性结果;同时扩增FMV35S启动子基因225 bp片段和PVY-cp基因161 bp片段.PCR反应循环参数是94℃2 min;94℃40 s,55℃60 s,72℃60 s,35次循环;之后72℃延伸5 min.本实验中的F-primer(PVY01-5′)/R-primer(PVY01-3′)引物是针对商业化种植的NewLeaf-YTM转基因马铃薯PVY-cp抗病毒基因而设计的,具有很强的特异性,可以达到对NeWLeaf-YTM转基因马铃薯鉴定的目的.
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