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观察胰腺癌PanC1细胞中组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)对E3泛素连接酶(Ring1B)抑制抑癌基因p16转录及表达作用的影响。
方法通过采用短发夹RNA(shRNA)分别在PanC1细胞中敲除Ring1B(重复2组为shRing1B#1、#2)和LSD1基因(shLSD1#1、#2)，未敲除组为shLuc，分别通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot检测PanC1细胞LSD1、Ring1B和p16基因的表达；而后通过质粒转染过表达Ring1B，再敲除LSD1基因，检测PanC1细胞p16的表达。
结果Ring1B基因敲除后RT-qPCR结果显示p16 mRNA转录增加，shRing1B#1、shRing1B#2(4.613±0.416、4.615±0.224)高于shLuc(1.010±0.032)(P＝0.000)；Western blot结果显示Ring1B基因敲除组p16蛋白表达增加；LSD1基因敲除后p16 mRNA转录和蛋白表达也增加，shLSD1#1、shLSD1#2组和shLuc组对应数值分别为4.704±0.503、3.885±0.011和1.008±0.027(P＝0.005)。Ring1B过表达的PanC1细胞中(Ring1B组)，LSD1敲除组shLSD1＋vector组(5.893±0.986)高于对照组shLuc＋vector组(1.010±0.201)；shLSD1＋Ring1B组(0.695±0.031)高于shLuc＋Ring1B组(0.156±0.016)(P＝0.001)。
结论LSD1与Ring1B协同作用，共同参与抑制胰腺癌p16的转录表达；LSD1能够增强Ring1B抑制p16转录的作用。