探讨微小RNA(miRNA，miR)-145对人韧带成纤维细胞(HLFs)向成骨细胞分化的影响及其可能的作用机制。
方法用含地塞米松、抗坏血酸和β-磷酸甘油培养液诱导HLFs细胞向成骨细胞分化，过表达或抑制细胞中miR-145水平，碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测ALP活性，Western blot分析骨代谢相关细胞因子以及Notch通路相关蛋白表达，荧光素酶报告基因方法检测miR-145靶基因。
结果强直性脊柱炎患者骨化韧带组织中miR-145表达水平显著下降(0.21±0.09比0.64±0.13；t＝7.543，P＝0.000)；与正常组比较，诱导液处理可显著抑制miR-145的表达(0.22±0.09比0.73±0.13；t＝4.812，P＝0.009)，提高ALP、成骨细胞特异性转录因子(OSX)、Runt相关基因2(Runx2)水平(157.9±23.8比76.7±19.2，t＝－4.599，P＝0.010；1.01±0.21比0.32±0.10，t＝－5.138，P＝0.007；0.95±0.32比0.27±0.08，t＝－3.571，P＝0.023)，同时抑制破骨细胞分化因子核因子κ B受体活化因子(RANK)及其配体(RANKL)表达(0.30±0.17比0.74±0.13，t＝3.561，P＝0.024；0.36±0.11比0.85±0.20，t＝3.718，P＝0.021)，miR-145过表达可显著削弱诱导液预处理带来的上述改变，而miR-145敲减可增加诱导液的作用；同时miR-145敲减可显著增加诱导液预处理诱导的Notch1、Hes1蛋白表达上调(1.81±0.19比1.20±0.23，t＝－3.542，P＝0.024；1.66±0.20比1.13±0.22，t＝－3.088，P＝0.037)，提高Notch通路活性，此种作用可被Notch通路抑制剂DAPT逆转；荧光素酶报告基因结果显示miR-145对Notch通路的作用可能通过直接靶向调控解整合素样金属蛋白酶17(ADAM17)蛋白表达实现。
结论miR-145可通过直接靶向ADAM17调控Notch通路活性，进而抑制HLFs向成骨细胞分化。