【摘 要】
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目的 高渗应激(HS)诱导的ROS-NLRP3-IL-1β信号通路激活被认为是干眼发病机制中上皮细胞炎症的关键步骤.本研究旨在研究金雀异黄素是否可以通过调节这一通路来保护人角膜上皮
【机 构】
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新疆医科大学第五附属医院眼科,乌鲁木齐,830011;610041,成都华厦眼科医院小儿斜弱视科
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目的 高渗应激(HS)诱导的ROS-NLRP3-IL-1β信号通路激活被认为是干眼发病机制中上皮细胞炎症的关键步骤.本研究旨在研究金雀异黄素是否可以通过调节这一通路来保护人角膜上皮细胞抑制HS诱导的炎症发生.方法 将人角膜上皮细胞(iHCEC和priHCEC)在各渗透压培养基(312、350、400、450mOsm/L)和50μmol/L金雀异黄素中按分组进行不同处理培养.采用CCK-8检测各处理iHCEC和priHCEC的活性.使用小干扰RNA (siRNA)来抑制iHCEC中NRF2的表达.通过RT-PCR检测各处理后iHCEC中NLRP3炎性体相关基因表达水平.ELISA检测各处理后iHCEC和priHCEC中IL-1β分泌水平.通过免疫荧光检测分析各处理后iHCEC中氧化应激标志物,相关试剂盒来检测不同处理iHCEC的酶活性.Western blot法检测各处理后iHCEC中NRF2的蛋白表达情况.结果 金雀异黄素可通过抑制ROS-NLRP3-IL-1β信号通路保护人角膜上皮细胞免受HS诱导的损伤.金雀异黄素显著抑制HS诱导的iHCEC中NLRP3炎性体相关基因的表达和IL-1β的分泌.金雀异黄素可显著减弱HS诱导的氧化应激,表现为金雀异黄素预处理后iHCEC内ROS生成量减少和8-OHdG阳性细胞数目减少.金雀异黄素诱导NRF2表达,从而触发几种抗氧化酶的表达.结论 金雀异黄素可以抑制HS诱导的人角膜上皮细胞炎症的发生,其可能具有在较早阶段预防和减轻与干眼相关的角膜炎症的作用.
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