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目的 研究不同剂量高铁血红素对脑内神经元、星形胶质细胞、脑毛细血管内皮细胞(BCEC)的损伤作用. 方法 (1)在原代培养大鼠脑皮质神经元、星形胶质细胞、BCEC上添加不同剂量(0、5、25、50 mmol/L)的高铁血红素孵育2h,去血红素后继续培养24或96 h,阿拉玛蓝染色检查细胞存活率,常规生化反应法检测乳酸脱氢酶(LCD)释放率,相差光学显微镜观察细胞形态.(2)在原代培养细胞上添加不同剂量血红素孵育2h,去血红素后继续培养4h,以浓甲酸裂解细胞,分光光度计下测定细胞内血红素含量.(3)在原代培养细胞上加血红素分别孵育30、60、120 min,去血红素后继续培养4h,以中性福尔马林液固定细胞,普鲁士蓝染色检查细胞内三价铁离子(Fe3+)染色情况. 结果 (1)神经元经5 mmol/L的血红素处理后24 h,存活率下降40.2%,LCD释放率增加22.2%,细胞形态出现严重损伤病变.随着时间延长和血红素剂量加大,细胞死亡率和LCD释放率均增加,细胞病变加重.(2)中、低剂量血红素(5 mmol/L、25 mmol/L)不引起星形胶质存活率、LCD释放率及细胞形态改变,高剂量血红素(50 mmol/L)在24 h后导致星形胶质细胞存活率下降52.4%,LCD释放率增加31.8%,并出现细胞病变;但96 h后损伤细胞得到修复,细胞重新形成致密单层,细胞存活率和LCD释放率均达正常水平.(3)无论低剂量或高剂量血红素均未引起BCEC存活率下降、LCD释放率升高或细胞形态学改变.(4)经不同剂量血红素处理2h后,神经元内血红素含量均明显升高,星形胶质细胞内血红素含量只有在大剂量血红素处理后才升高,BCEC内血红素含量未见升高.(5)神经元接触血红素30 min后细胞内即出现大量Fe3+染色阳性颗粒,随着接触时间延长和剂量加大,Fe3+染色阳性细胞数增多;星形胶质细胞Fe3+染色阳性细胞数明显少于神经元,BCEC几乎不出现Fe3+染色阳性细胞. 结论 (1)血红素对神经元具有严重的直接损伤作用,对星形胶质细胞有可逆的损伤作用,对BCEC无直接损伤作用.(2)血红素能快速进入神经元并在神经元内积累,但较少在星形胶质细胞脑积累,难以在BCEC内积累.